【摘 要】
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目的 本实验采用直接接触法,运用异硫氰酸荧光素（fluorescein isothiocyanate,FITC）标记的膜联蛋白V（FITC-AnnexinV）结合碘化丙啶（propidium iodide,PI）染色双参数技术对磁性附着
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目的 本实验采用直接接触法,运用异硫氰酸荧光素（fluorescein isothiocyanate,FITC）标记的膜联蛋白V（FITC-AnnexinV）结合碘化丙啶（propidium iodide,PI）染色双参数技术对磁性附着体金属材料261铁素体不锈钢引起小鼠成纤维细胞L929的死亡类型进行定量检测,并与Tilite含钛医学合金、CoCr合金相比较,以评价材料的生物相容性并分析死亡类型与其细胞毒性的关系。 材料与方法 1.实验材料制备:三组实验材料（Tilite含钛医学合金、CoCr合金和261铁素体不锈钢）制备成直径12mm,厚度1mm的圆盘,一面高度抛光。使用前用超声波振荡清洗,酒精脱脂,去离子水冲洗并烘干后,高压蒸汽灭菌。 2.细胞培养:取复苏后的L929细胞,放入37℃、95%相对湿度、5%CO2培养箱中培养,选取待细胞达到对数生长期后,选取存活率>95%的细胞。 3.材料与细胞联合培养:将3组无菌金属圆盘放入24孔培养板底部,与L929细胞联合培养18小时和24小时。 4.AnnexinV-FITC/PI实验:收集细胞,调整细胞密度为1×106/ml,AnnexinV-FITC/PI染色,流式细胞仪分析。结果判定:正常活细胞:AnnexinV-FITC（-）/PI（-）;早期凋亡细胞:AnnexinV-FITC（+）/PI（-）;晚期凋亡/坏死细胞:AnnexinV-FITC（+）/PI（+）。 5.数据分析:采用SPSS12.0统计软件,进行方差分析和t检验,P值<0.05认为有统计学意义。
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