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背景:鼻咽癌（nasopharyngeal carcinoma,NPC）是一种鼻咽部恶性上皮肿瘤,鼻咽癌病例主要分布在东亚和东南亚国家及我国两广地区鼻咽癌在不同地域的人群发病率不同,例如在在中国华南的高风险地区,男性和女性的发病率分别为27.2/100,000和11.3/100,000,而其他人群的发病率＜1/100,000。鼻咽癌具有多个众所周知的环境风险因素包括烟草、酒精以及含有高亚硝酸盐成分的腌制食物,其中最主要的就是EBV感染。鼻咽癌分为三种病理亚型:角化鳞状细胞癌、非角化癌和基底样鳞状细胞癌,其中非角化癌又可分为分化型和未分化型癌症,已经证明其癌症高发癌症类型主要与EBV相关。持续性EBV感染和基因组改变会促进鼻咽癌形成过程,EBV持续感染基因突变的上皮细胞及感染EBV的细胞过度增殖被认为是启动机体鼻咽上皮细胞致癌性转化的先决条件。鼻咽癌转移性极高,其首选的治疗方法主要取决于肿瘤淋巴结转移tumor node metastasis（TNM）分期类型,早期鼻咽癌患者接受放疗,晚期鼻咽癌患者接受放化疗治疗。尽管鼻咽癌患者对放疗敏感,但依旧约30%的患者对治疗无明显反应进而发展为局部复发和癌细胞远处扩散。但导致治疗失败的原因目前我们仍不清楚,因此,急需寻找鼻咽癌新的分子标志物和治疗靶点。人类PVT1基因位于染色体8q24区域,PVT1能够从改变肿瘤细胞与周围正常组织之间的粘附力,促使肿瘤细胞与原发肿瘤组织脱离,加速细胞外基质降解,修饰细胞骨架增强肿瘤细胞运动力,促进肿瘤组织中的血管生成等方面影响肿瘤细胞上皮-间质转化epithelial–mesenchymal transition（EMT）和远处转移。在PVT1基因上发现包含多个micro RNAs（miRNAs）反应元件,特定的micro RNAs能够与之结合,从而使这些micro RNAs沉默并上调某些蛋白质的表达,其最终影响肿瘤的增殖,侵袭转移和对化疗药物的耐药性。PVT1本身可以剪接成6种不同的micro RNAs,即miR-1204,miR-1205,miR-1206,miR-1207-5p,miR-1207-3p和miR-1208,这些micro RNAs具有抑癌或促癌功能。目前针对鼻咽癌的分子标志物和靶点的研究一直是研究热点,我们发现micro RNA-1205（miR-1205）能够通过靶向抑制EGLN3蛋白表达进而促进鼻咽癌细胞的转移,我们的研究可能为鼻咽癌的治疗提供新的靶向位点和思路。目的:（1）探讨miR-1205是否影响鼻咽癌的发展进程。（2）如何寻找验证鼻咽癌中miR-1205的下游靶基因。（3）探究miR-1205及下游靶基因在鼻咽癌中作用的分子机制。方法:（1）本课题首先对鼻咽癌数据库中的数据进行分析鉴定,我们发现鼻咽癌患者癌组织标本中miR-1205的表达水平高于正常组织。随后我们采用实时荧光定量PCR检测,发现miR-1205在鼻咽癌细胞系的表达水平上升。（2）为测定miR-1205对鼻咽癌细胞系侵袭转移的影响,首先使用转染试剂将p SIF-miR1205和p CDH-miR1205-sponge质粒转染至鼻咽癌细胞系,随后进行细胞划痕实验,每个实验组于4倍物镜下按照随机原则选5个视野,拍摄各实验组对应的0h与24h细胞划痕区域,然后计算各组相对应视野的细胞划痕愈合面积。进一步测定miR-1205对鼻咽癌细胞系侵袭转移的影响,又进行Transwell实验,每个实验组设置3个复孔,迁移24h后使用结晶紫染色,随机选取5个视野于10倍物镜下拍照作图。（3）探讨miR-1205对鼻咽癌细胞系增殖的影响,miR-1205 mimics或miR-1205 inhibitor转染至鼻咽癌细胞,并采用CCK8实验和平板克隆实验检测miR-1205对细胞增殖影响。（4）探讨EGLN3是否为miR-1205的靶基因,使用三个micro RNAs数据库通过多种算法预测miR-1205靶基因,进一步对鼻咽癌数据库分析,发现鼻咽癌患者癌组织标本中EGLN3的表达水平显著低于正常组织样本。Western blot实验也提示miR-1205在鼻咽癌细胞中抑制EGLN3的蛋白表达。（5）测定EGLN3对鼻咽癌细胞系迁移的影响,构建鼻咽癌EGLN3过表达和敲低稳定细胞株,随后在稳定细胞株中进行细胞划痕。（6）进一步分析miR-1205调控EGLN3促进鼻咽癌细胞的迁移,在SUNE1和HONE1过表达EGLN3的稳定细胞株中转染p SIF-miR1205质粒,在HNE1和CNE2敲低EGLN3的稳定细胞株中转染p CDH-miR-1205 sponge质粒之后进行Transwell细胞转移实验。结果:1.miR-1205miR-1205在鼻咽癌临床样本和鼻咽癌细胞系中表达上调。2.miR-1205促进鼻咽癌细胞的迁移。3.miR-1205对鼻咽癌细胞系的增殖没有影响。4.鼻咽癌患者癌组织标本中EGLN3的表达水平显著低于正常组织样本,miR-1205能够抑制EGLN3蛋白的表达。5.EGLN3抑制鼻咽癌细胞的迁移响。6.过表达EGLN3抑制miR-1205介导的转移,敲低EGLN3促进miR-1205介导的转移。结论:1.miR-1205促进鼻咽癌细胞的迁移;2.EGLN3抑制鼻咽癌细胞的迁移;3.miR-1205能够靶向EGLN3的3’UTR并抑制EGLN3蛋白的表达;4.miR-1205通过抑制EGLN3的表达而促进鼻咽癌细胞的迁移。