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目的：检测Bcl-2mRNA在大肠癌组织、腺瘤组织、溃疡性肠炎、肠息肉、和正常大肠粘膜组织中的表达，探讨Bcl-2在大肠癌组织中及大肠癌前期病变的表达与对照组（健康人）表达的相关性;通过分析肠道组织中Bcl-2表达与大肠癌临床表现的关系，探讨Bcl-2检测辅助判断大肠癌的早期诊断和进展情况的可能性。方法：采用实时荧光定量PCR仪（SYBR Green染料法）对大肠癌组织、腺瘤组织、溃疡性肠炎、肠息肉、和正常大肠粘膜脱落细胞中的Bcl-2mRNA进行相对定量检测。为了建立一种基于实时荧光相对定量PCR技术并应用之于大肠癌分子诊断,选择位于人染色体18q21,编码一个26kD的Bcl-2蛋白为目的基因,以12号染色体上的磷酸甘油醛脱氢酶基因(Actin)为参照基因,设计合成两对引物，通过染料法,在同反应管中进行扩增。以相对定量指标△CT值区分肠道肿瘤患者与正常人。通过优化反应条件,使得目的基因和参照基因的浓度基本一致,取2ulRNA稀释100倍，进行光密度分析结果260nm/280nm均在1.9-2.1之间。为了保证起始RNA量相同，用DEPC水调整RNA浓度。用调整后的RNA，按照逆转录试剂盒说明书合成cDNA。以该浓度的RNA作为模板进行批内和批间实验的△CT值重复性好，变异系数低。运用相对定量的2-△△Ct法计算Bcl-2mRNA的相对表达量。结果：本实验结果显示：运用建立的方法检测35例大肠癌患者的肠道脱落细胞标本和35例正常人的肠道脱落细胞本,正常人△CT值范围是6.63～7.92,大肠癌患者的△CT值范围是5.92～6.81,两组之间存在少量的交叉重叠部分,但是有显著差异(P＜0.001)；大肠腺瘤组的△CT值平均值为4.75，范围在3.34～5.14之间，与对照组无重叠，经统计学分析存在显著差异（P=0.0006<0.01）；大肠大肠息肉组的△CT值平均值为6.28，范围在5.23～6.83之间，与对照组存在少量的交叉重叠部分，经统计学分析存在显著差异（P=0.002<0.01）；溃疡性结肠炎组的△CT值平均值为5.25，范围在4.92～5.50之间，与对照组无重叠，经统计学分析存在差异（P=0.001<0.05）；相对定量采用2-ΔΔ Ct法，大肠癌组是正常组的1.88倍，大肠息肉组是正常组的2.147倍，大肠腺瘤组是正常组的6.49倍，溃疡性结肠炎组是正常组的4.15倍。因此,实时荧光定量PCR比较△CT值的相对定量法快速诊断大肠癌是可行的。结论：建立的SYBR Green荧光实时定量PCR方法操作简单、灵敏，稳定性和重复性好。肠道脱落细胞中Bcl-2基因相对定量的表达与患者所患疾病状态有关，均高于正常人肠道脱落细胞中Bcl-2基因相对定量的表达。其中大肠腺瘤的相对定量的表达最高，溃疡性结肠炎、大肠息肉、大肠癌呈依次递减关系。