聚甲基丙烯酸羟乙酯晶胶微球制备及ATP分离研究

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甲基丙烯酸羟乙酯(HEMA)共聚物具有良好的亲水性及生物相容性,以HEMA为基质制备的多孔微球在生化及制药领域已成为科研工作者们研究热点。传统聚甲基丙烯酸羟乙酯(pHEMA)微球制备方法主要有悬浮聚合法,乳液聚合法,种子聚合法等。但这些制备工艺存在粒径不易控制,分布不均一,过程复杂等问题。各科研工作者一直在探索制备粒径可控且分布均一的pHEMA微球新工艺,近年来微通道成为制备粒径可控且均一微球的有效方法。通过结晶致孔法制备的晶胶介质在生物分离方面已有广泛应用。本文利用“十”字型微通道结合结晶致孔的方法制备pHEMA晶胶微球,实验考察了 pHEMA晶胶微球的制备条件。通过此工艺制备的pHEMA晶胶微球粒径分布均匀,内部孔隙发达,连通性良好。pHEMA晶胶微球填装于玻璃层析柱内,晶胶微球在NaCl溶液和二过碘酸合铜(Ⅲ)钾(K5[Cu(HIO6)2])的共同催化作用下失去一个氢成为自由基,然后引发功能单体甲基丙烯酸二甲氨乙酯(DMAEMA)上的乙烯键打开与之发生聚合,从而将功能基团引入pHEMA晶胶微球。本论文考察了阴离子交换型晶胶微球填充床层析分离啤酒酵母转化液中ATP。实验结果表明,该晶胶微球填充床在2 cm/min流速下从三组不同ATP含量转化液中层析分离ATP均可达到晶胶介质的分离效果,纯度达93.4~96.9%,总回收率为47.0~82.7%。同时实验研究了该晶胶微球填充床在5、10 cm/min高流速下层析分离ATP,实验结果表明,由于微球之间存在较大间隙,吸附力较弱的一磷酸腺苷(AMP),二磷酸腺苷(ADP)和其它杂质在高流速下大部分已流出床柱。因此,与连续床晶胶介质相比,pHEMA晶胶微球填充床高流速下的也可获得高纯度的ATP。
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