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目的甲状腺功能减退症(甲减)能引起前额叶皮层结构损伤,其损伤可涉及突触结合蛋白synaptotagmin-1(syt-1)的表达。现临床标准的甲状腺素(T4)替代治疗不一定能使前额叶皮层损伤蛋白恢复至正常水平。本课题通过予以甲减大鼠模型T4和多奈哌齐(DON)治疗,探索T4联合DON对甲减大鼠前额叶皮层内syt-1的影响。方法选取50只健康的Sprague-Dawley(SD)系大鼠,保证统一为10周龄、雄性、清洁级。根据药物处理因素的差别,实验共设计为5组,将大鼠进行随机分组,分别为:正常对照组(CON组)、甲减组(Hypo组)、多奈哌齐治疗组(DON组)、甲状腺素治疗组(T4组)、甲状腺素联合多奈哌齐治疗组(T4+DON组)。CON组饮用干净自来水6周,余组均予以0.05﹪丙基硫氧嘧啶(PTU)等量饮水6周建立甲减模型。第5周开始,继续上述造模方法的情况下,DON组予以多奈哌齐浓度为0.005﹪(W/V)的饮用水、T4组给予甲状腺素浓度为6ug/100g的无菌生理盐水腹腔注射、T4+DON组同时给予以上两种治疗,CON组、Hypo组、DON组给予等量生理盐水腹腔注射。各组大鼠完成为期6周的造模后进行取材。抽取腹主动脉血,经离心提取澄清血清,再用放射免疫法测定各组大鼠血清T3、T4水平;分离提取左右大脑半球,将右侧大脑-80冷冻保存,待用Western blot法检测分析各组大鼠前额叶皮层中syt-1的表达水平;将左侧半球石蜡包埋,做成切片保存,再用超敏免疫组化染色法检测分析各组大鼠前额叶各层中目的蛋白syt-1免疫反应产物的表达分布。结果1.各组大鼠血清甲状腺激素水平:放射免疫试剂盒方法检测结果显示:与CON组相比,Hypo组大鼠血清甲状腺激素水平T3及T4含量均明显降低,浓度降低水平均有统计学意义(P<0.01);经治疗组中,DON组大鼠血清T3及T4浓度降低均水平仍有统计学意义(P<0.01),T4组和T4+DON组大鼠血清T3及T4浓度较CON组均无统计学意义。2.各组大鼠前额叶内蛋白syt-1的表达:Western blot测定结果显示:与CON组相比,Hypo组大鼠前额叶皮层内syt-1表达均明显增加,各组目的蛋白表达增加水平有统计学意义(P<0.01);经治疗组中,DON组、T4组前额叶皮层内syt-1表达水平较CON组增加水平仍有统计学意义(P<0.05),T4+DON组大鼠前额叶内蛋白syt-1的表达较CON组差异无统计学意义。3.各组大鼠前额叶各层syt-1表达及分布情况:超敏免疫组化染色法测定结果显示:syt-1经超敏免疫组化染色法所显示的免疫反应产物呈棕黄色颗粒。各组大鼠前额叶内均分布有棕黄色颗粒,但各组之间棕黄色颗粒的含量存在差别。通过光学显微镜观察大鼠前额叶皮层存在清晰分明的5层结构,由外向内依次为:分子层(第I层)、外颗粒层(第II层)、外锥体层(第III层)、内颗粒层(第IV层)、内锥体层(第V层)。Hypo组大鼠前额叶皮层内每一层存在的目的蛋白syt-1表达水平较CON组相对应层均增加,且各层增加水平均有统计学意义(P<0.01)。经治疗组中,DON组、T4组大鼠前额叶各层蛋白Syt-1表达水平较CON组对应层仍有所增加,各层增加的差异均有统计学意义(P<0.05);T4+DON组大鼠前额叶各层蛋白syt-1表达水平较CON组对应层差异均无统计学意义。结论1.甲减可致大鼠前额叶内蛋白syt-1表达升高。2.甲减对大鼠前额叶皮层内分子水平的影响经过替代治疗可以得到改善,但经标准剂量的T4替代治疗后,甲减大鼠前额叶皮层内损伤蛋白syt-1未能得到完全恢复。3.甲减所致大鼠前额叶皮层内syt-1表达异常,经T4联合DON治疗后syt-1可完全恢复。