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在世界范围内,由赤潮毒素引起的人员中毒和死亡事件屡见不鲜,其中以麻痹性贝毒(paralyticshellfishpoisoning,PSP)和腹泻性贝毒(diarrheticshellfishpoisoning,DSP)的危害最为严重。麻痹性贝毒(PSP)是一类阻断神经细胞钠离子通道,对人体神经系统产生麻痹作用的海洋生物毒素。该毒素对人体毒性极强,当人们误食染毒的贝类时就可能发生中毒死亡。近年来,赤潮在我国海域的发生频率不断上升,其中东海海域已经成为赤潮高发区。
为了筛选麻痹性贝毒毒性早期预测指标,本论文采用膝沟藻毒素GTX-1,4对小鼠进行暴露,剂量为1μg/kg,时间为60、90、120min。测定各器官中胆碱能神经递质(ACh/AChE)和一氧化氮神经递质(NO/NOS)的变化,分析其能够作为毒性早期预测指标的可能性,同时试探性研究了暴露后肝脏、肾脏中氧化损伤指标(GSH、GSH-px、SOD)的变化。结果发现暴露组脑中神经递质指标的变化在较短时间内就与对照组表现出明显的差异(P<0.01),同时具备了敏感性和持续性,适合作为麻痹性贝毒的早期预测指标;另外,肝、肾中关于庥痹性贝毒导致氧化损伤的初探性研究结果表明肾中GSH含量对毒性作用较为敏感,但需要进一步的实验验证其作为早期预测指标的可能性。
结合前阶段筛选出的麻痹性贝毒相对敏感的部位及指标,我们深入研究毒素在小鼠血、脑中的变化规律,从而建立PSP的快速检测方法。将GTX-1,4的暴露时间控制在15min,设定剂量梯度0.5、1、3、5、7、9μg/kg,研究神经递质指标的变化情况及其与PSP浓度之间的关系。结果表明,短时间(15min)内胆碱能神经递质AchAchE的变化与暴露浓度呈现出剂量—效应关系,此时通过对浓度曲线的观察能够半定量或定量的判断毒素范围。采用血液浓度曲线分析贝类样品中麻痹性贝毒的含量,该方法改进了传统检测海产品中PSP的小鼠生物法,其灵敏度高、检测限低,又避免了实验动物的大量伤害,是一种快速而非常有潜力的检测技术。