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目的通过研究不同剂量阿霉素大鼠肾皮质氧化应激反应指标和肾小球足细胞裂隙膜蛋白Podocin的定量及分布及其相互关系,探讨氧化应激反应在裂隙膜分子损伤中的作用材料与方法(1)实验动物及分组32只6-8周龄、体重180g~220g的清洁级雄性SD大鼠按ADR给药剂量分为:小剂量组(3.0mg/kg),中剂量组(7.5mg/kg),大剂量组(10.0mg/kg),正常对照组(生理盐水),每组8只。于给药第三周末收取24小时尿,处死大鼠留取肾皮质备检。(2)观察指标24小时尿蛋白排泄量;肾皮质MDA、SOD、GSH-PX、.OH;免疫胶体金电镜观察podocin蛋白定位,SABC免疫组化染色观察podocin染色强度,显微镜下摄片及图像量化分析肾小球足细胞裂隙膜分子podocin蛋白的表达。结果(1)24小时尿蛋白排泄量(mg/d):正常对照组7.98±3.01;小剂量组14.35±9.72,中剂量组88.46±23.52,大剂量组14.42±8.57。ADR处理组与正常对照组之间差异显著,尤以中剂量组最显著(P<0.01)。(2)肾皮质氧化应激指标: MDA(U/mg pr):正常对照组1.45±0.12,小剂量组1.87±0.16,中剂量组2.73±0.20,大剂量组2.10±0.30。SOD(U/mg pr):正常对照组504.45±43.84,小剂量组425.37±35.93,中剂量组411.96±45.04,大剂量组442.96±23.13。ADR处理组与正常对照组之间差异显著,尤以中剂量组最显著(P<0.01)。与正常对照组相比较,ADR处理组GSH-PX含量升高,.OH含量没有明显的变化。(3)肾小球足细胞裂隙膜蛋白podocin的表达:免疫组化染色显示正常对照组大鼠podocin沿肾小球基底膜呈深褐色连续、线形分布,在中剂量组染色明显变浅,呈淡褐色点状或短线条状分布;量化分析显示,ADR大鼠肾小球podocin阳性表达指数明显低于正常对照组,尤以中剂量组最显著(P<0.01)。podocin免疫胶体金电镜检查显示正常对照组大鼠podocin分布在靠近肾小球基底膜(GBM)的足突基底部,主要定位于裂隙膜的胞质面,部分金颗粒也可发现于GBM稍远的足突细胞表面.中剂量组肾小球足突广泛融合,免疫胶体金颗粒几乎见不到。(4)相关分析结果:肾小球podocin蛋白阳性表达指数与24小时尿蛋白排泄量及肾皮质MDA浓度呈负相关,与肾皮质SOD浓度呈正相关。结论(1)ADR大鼠肾小球足细胞裂隙膜蛋白podocin表达明显降低,证实蛋白尿的发生与肾小球足细胞裂隙膜蛋白podocin的变化密切相关。(2)ADR大鼠肾皮质MDA水平明显升高、SOD水平明显下降,并且肾小球podocin蛋白阳性表达指数与肾皮质MDA浓度呈负相关、与SOD浓度呈正相关提示肾小球足细胞裂隙膜蛋白podocin的减少或缺失与以脂质过氧化反应为主的氧化应激反应密切相关。