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桔梗[Platycodon grandiflorum（Jacq）A.DC.]是桔梗科多年生草本植物,在我国拥有广泛的种植面积。多糖是生命活动中重要的营养物质之一,具有许多非常重要且特殊的理化特性和生理活性,如毒性小、较安全、功能多样等。从植物中提取的水溶性多糖有极其广泛的药理活性,主要有增强免疫、调节血脂、抗肿瘤、抗衰老等作用,同时还能降血糖和抗氧化。研究表明,桔梗多糖（PGP）作为桔梗的主要成分,具有抗氧化、抗癌及免疫力增强等多种药理作用,但其对神经相关的保护作用报道甚少。氧化应激（Oxidative stress,OS）介导的细胞损伤长期以来被认为是包括阿尔茨海默症（Alzheimer’s disease,AD）在内的神经退行性疾病的主要致病因素。桃胶（peach resin）是蔷薇科植物桃树[Prunus persica（L.）Batsch]或山桃树[Prunus davidiana（Carr.）Franch]分泌出的树脂,桃胶的主要成分是多糖,具有清除自由基和抗氧化的作用。研究目的:本文对PGP单糖组成、纯度、分子量进行鉴定,同时建立PC12细胞的H202损伤模型,主要研究桔梗多糖（PGP）对H2O2致PC12细胞氧化应激损伤的保护作用机制,初步探索PGP发挥神经保护作用的潜在机制,为PGP在神经退行性疾病,包括AD方面的治疗研究提供理论基础和参考依据;本文优化了桃胶面膜的制备方案,为桃胶多糖的研究提供基础。研究方法:通过蒽酮-硫酸法、紫外分光光度计法、高效液相色谱法（HLPC）、高效凝胶排阻色谱法（HPGPC）对PGP单糖组成、分子量和纯度进行鉴定。建立H202诱导的PC12细胞氧化损伤模型,MTT法检测药物对PC12细胞的增殖影响,包括H202对PC12细胞增殖的影响以及不同剂量PGP对PC12细胞增殖的影响;比色法测定细胞内乳酸脱氢酶（LDH）、丙二醛（MDA）含量、超氧化物歧化酶（SOD）（WST-8法）以及谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）的活性;DCFH-DA荧光探针结合流式细胞仪检测细胞内ROS含量;Q-PCR、WesternBloting方法分别检测PGP对H2O2诱导PC12细胞的NADPH氧化酶2（NOX2）及其家族亚基p22phox、Rac的mRNA和蛋白表达。原桃胶水解脱色得桃胶多糖粗品,加辅料制成桃胶面膜;单因素和正交实验测定保湿率。研究结果:HPLC检测结果显示PGP主要由葡萄糖、半乳糖和甘露糖,摩尔比为7.0:1.1:0.6;HPGPC检测显示PGP的洗脱曲线是单一对称峰,分子量Mw约为5.9×103Da;MTT法结果显示,在H202引起PC12细胞损伤的同时加入浓度为50、100、200μg/mL的PGP能够缓解细胞氧化损伤;与模型组相比,PGP预处理24h后,加入终浓度为600 μmol/LH202处理2h,LDH、MDA含量和细胞内ROS减少,SOD与GSH-Px活性增强,同时,PGP下调NOX2及其家族亚基p22phox、Rac的mRNA和蛋白的表达水平。桃胶面膜优化制备方案:温度70℃,加热时长20min;优化配方:聚乙烯醇13.2g、海藻酸钠2g、桃胶4g、羧甲基纤维素钠2.6g、丙三醇4ml、海藻酸钠2g、苯甲酸钠0.5g、香精2滴、纯水100ml。结论:PGP是一种以葡聚糖为主的均一多糖,H2O2对PC12细胞的损伤呈剂量依赖性,PGP对PC12细胞安全无毒性,且对H2O2诱导的PC12细胞的氧化损伤具有保护作用,减少细胞的凋亡,其作用机制可能与抑制NADPH氧化酶2（NOX2）的过表达有关。桃胶适合制备桃胶面膜,效果良好。课题意义:本课题对桔梗多糖进行了成分和纯度的鉴定,目前国内外关于PGP神经保护作用的相关研究甚少,本课题为PGP作为抗氧化以及神经保护作用药物的研究提供了一定的理论基础和参考依据。本课题还优化了桃胶面膜的制备方案,为桃胶资源的利用提供了新方向,也为桃胶多糖的研究提供了基础。