寡聚中长链羟基脂肪酸酯对小鼠成纤维细胞L929增殖影响的研究

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聚羟基脂肪酸酯(PHA)家族成员羟基己酸、羟基辛酸、羟基癸酸和羟基十二酸的共聚物,统称中长链聚羟基脂肪酸酯,即mcl PHA。因其具有良好的生物相容性和弹性,从而具有广泛的生物医学应用前景。本课题采用醇解方法降解大分子mcl PHA,对降解产物进行了色谱和核磁分析,并研究了mcl PHA等醇解得到的低分子量的甲酯衍生物对小鼠成纤维细胞L929的影响。  利用甲醇解方法获得低分子量中长链聚羟基脂肪酸酯,最终产物是寡聚体的甲酯衍生物。结果显示,通过冷凝回流装置将分子量为17万的mcl PHA降解为平均分子量为2000-3000的寡聚体,并且通过多种方法去除了有机溶剂。这为研究聚羟基脂肪酸酯的降解产物提供了一种新方法。  本课题采用甲醇降解法制备OmclHA等的甲酯衍生物,首先利用四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色法(MTT)实验研究寡聚体甲酯衍生物OmclHA-OCH3等对L929细胞增殖的影响。研究结果表明,与对照组相比,制备的OHA甲酯衍生物有一定的细胞毒性,OmclHA-OCH3对L929细胞具有轻微抑制作用,培养48小时的时候,0.02g/L OmclHA-OCH3使细胞代谢活性降低5%,而0.05g/L OmclHA-OCH3使细胞代谢活性降低10%。与其他寡聚体组相比,这种抑制作用似乎也和侧链长短有关系,随着寡聚体侧链的延长,这种抑制作用在降低。其次,OHA甲酯衍生物引起了细胞的凋亡,凋亡的发生同样和浓度效应与侧链效应有关,推测这种作用是由于延迟的细胞周期作用的结果。再次,系列OHA甲酯衍生物引发胞内钙离子浓度的变化,与阴性对照组相比钙离子浓度升高2-4倍,钙离子浓度变化解释了细胞凋亡的原因。  由于PHA降解中间产物对细胞的作用的研究,模拟了组织工程材料在体内降解产品对组织的影响,这可能为选择更加优良的生物相容性材料提供了相关线索。
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