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光合作用过程中光能的吸收和传递是由镶嵌在脂双分子层中的多个色素蛋白复合物完成的。其中,光系统Ⅱ(PSⅡ)是一个含有多个跨膜区的多亚基色素蛋白复合物,它能够吸收太阳光能裂解水,同时释放出氧气并传递电子和质子。捕光色素蛋白复合物(LHCⅡ)和PSⅡ核心结合形成多种形态的PSⅡ-LHCⅡ超分子体系,更有效地吸收能量并传递到反应中心。另外,类囊体膜脂和蛋白之间的相互作用在调节超分子复合物多个亚基之间结构和功能的联系上发挥重要作用。
本文从豌豆类囊体膜中分步提取出三种PSⅡ蛋白复合物,结合电泳和光谱分析鉴定出三种复合物主要区别是LHCⅡb的含量不同;测定了三种PSⅡ色素蛋白复合物在不同光强下放氧活性的变化;并将PSⅡ核心复合物和捕光色素蛋白复合物(LHCⅡb)重组到四种类囊体膜脂(单半乳糖甘油二酯MGDG,双半乳糖甘油二酯DGDG,硫代异鼠李糖甘油二酯SQDG,磷脂酰甘油PG)形成的脂质体上,研究了PSⅡ核心复合物与LHCⅡ在脂双分子层中的结构和功能的联系。主要结果如下:
1.LHCⅡb含量不同的三种PSⅡ复合物的放氧活性都有光饱和点,且PSⅡ-LHCⅡ超分子体系在少于2个外周天线时不能发挥正常的光化学活性。
2.通过分阶段引入Ca2+,在脂质分子形成片层状结构过程中使Ca2+均匀地分布在脂质体内外,避免了Ca2+引起的脂质体聚集。
3.冷冻蚀刻透射电镜图像和聚蔗糖超速离心证明,通过浓度为0.1%的β-DDM介导,在不损伤脂双分子层和色素蛋白复合物的情况下,能够有效的将色素蛋白复合物重组到脂双分子层中去。
4.重组到脂质体上的核心复合物比未重组时放氧活性高,表明脂环境有利于PSⅡ核心复合物维持稳定的结构,发挥正常的功能。其中PSⅡ粗核心活性上升最为显著。
5.PSⅡ纯核心复合物和LHCⅡb共重组后,尽管放氧活性没有明显上升,但光谱显示它们之间存在有效的能量传递。