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本试验旨在研究益生菌对乳仔猪生长性能和健康的影响,主要分两部分进行。首先,通过乳酪杆菌和粪肠球菌对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的抑菌试验,获得两种益生菌的最佳配比。其次,通过对乳仔猪灌服复合益生菌,观察其对仔猪生长性能和胃肠道微生物区系等方面的影响。试验选择品种相同、出生日期相近、体重相近的初生仔猪15窝,每窝选择8头仔猪(公母各半),分为4个处理组,每窝每组两头仔猪,这样每个处理组有15个重复共30头仔猪。试验分组如下:对照组,灌服生理盐水;试验Ⅰ组,灌服乳酪杆菌培养液;试验Ⅱ组,灌服粪肠球菌培养液;试验Ⅲ组,灌服乳酪杆菌和粪肠球菌混合培养液。仔猪初生时灌服1 mL,之后在7、14和21d时分别灌服2 mL、3 mL和4 mL,共四次。试验结果如下:(1)复合益生菌最适配比的确定:用MRS培养基分别培养乳酪杆菌和粪肠球菌,调整活菌数为1×108 CFU/mL,以1%接种量,进行两种益生菌标准生长曲线的绘制。通过在不同时间测定OD值,p H值和活菌数,绘制两种菌的生长曲线。结果表明,乳酪杆菌和粪肠球菌的最佳培养时间分别为36 h和24 h。采用乳酪杆菌和粪肠球菌按不同比例混合,进行对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的抑菌试验。结果发现,相对于单一菌来说,两种菌混合使用具有更好的抑菌效果,其中当乳酪杆菌和粪肠球菌比例为3:1时,抑菌圈直径最大(P<0.05),说明该配比抑菌作用最强。(2)益生菌对仔猪生长性能的影响:试验结果表明,灌服益生菌组仔猪的平均日增重显著高于对照组(P<0.05),以两种益生菌组合组仔猪平均日增重最高,但是与试验Ⅰ组和试验Ⅱ组相比差异不显著(P>0.05);同时益生菌组仔猪的腹泻率和死亡率与对照组相比显著降低(P<0.05),三组益生菌组之间差异不显著(P>0.05)。(3)益生菌对仔猪消化道酶活和血液生化指标的影响:灌服复合益生菌组仔猪的胃、十二指肠和结肠中蛋白酶活性与对照组相比显著提高(P<0.05);同时灌服复合益生菌组仔猪28 d粪便中蛋白酶活力显著地高于对照组和试验Ⅰ组(P<0.05),而21 d各组粪样中的蛋白酶活差异不显著。复合益生菌组仔猪十二指肠和盲肠淀粉酶活性显著高于对照组(P<0.05),而胃和结肠中淀粉酶活性差异不显著(P>0.05);21 d和28 d粪样中淀粉酶活各组之间均差异不显著(P>0.05)。说明益生菌可提高仔猪消化道中蛋白酶和淀粉酶的活性。三个益生菌组21 d仔猪血清IgA的含量显著高于对照组(P<0.05),而试验Ⅱ组IgG的含量显著高于对照组和试验Ⅲ组(P<0.05);试验Ⅲ组血清ALT和AST的含量显著低于对照组(P<0.05);ALP和BUN的含量各组之间没有显著差异;试验Ⅲ组GGT含量与对照组相比差异不显著,与试验Ⅰ和Ⅱ组相比差异显著(P<0.05)。(4)益生菌对仔猪胃肠道内容物pH值、乳酸菌和大肠杆菌数量的影响:灌服复合益生菌组仔猪的胃和十二指肠内容物pH显著低于对照组(P<0.05),空肠、盲肠和结肠内容物的pH值与对照相比没有显著差异(P>0.05),但均低于对照组。除直肠外,消化道各段内容物及粪便中乳酸菌和大肠杆菌的数量在各个处理组间均差异不显著(P>0.05),但三个益生菌组胃肠道中大肠杆菌数量均低于对照组(P>0.05)。(5)益生菌对仔猪肠道黏膜免疫作用和微生物区系的影响:灌服复合益生菌组仔猪的小肠绒毛长度显著高于对照组(P<0.05);复合益生菌可显著降低仔猪肠膜上促炎因子TNF-α的表达量(P<0.05),而提高抗炎因子TGF-β的表达量(P<0.05),从而提高机体的免疫力。整体来看,复合益生菌组仔猪21 d胃、小肠和盲肠微生物相似性系数高于对照组,结肠和直肠微生物相似性系数则低于对照组;不同日龄仔猪粪样的微生物相似性系数差异较大,但是益生菌组不同日龄之间粪样中微生物相似性系数均高于对照组,说明益生菌能使仔猪胃肠道微生物区系趋向稳定。综上所述,益生菌通过调节乳仔猪胃肠道微生物区系,提高有益菌数量并降低大肠杆菌的数量,提高肠黏膜的免疫功能及消化道蛋白酶和淀粉酶的活性,降低仔猪腹泻率和死亡率,最终达到提高仔猪生长性能目的。