论文部分内容阅读
本研究分离了自然条件下感染红火蚁的一株虫生真菌，同时测定来自不同来源的6株白僵菌、绿僵菌对红火蚁的致病力，筛选出了致病力强、作用速度快的白僵菌菌株Bb04。在此基础上测定了Bb04菌株对红火蚁幼虫及蛹的致病力以及温度对该菌株感染红火蚁工蚁能力的影响，初步研究了该菌株在红火蚁蚁巢中的水平传递能力，并测试了该菌株在土壤中对红火蚁工蚁的致死情况。现将主要结果分述如下：
(1)自然寄生红火蚁病原真菌的分离、鉴定与筛选：自红火蚁活虫体上分离到一株淡紫拟青霉，经柯赫氏法则确定为红火蚁的病原真菌。将此菌单孢分离10个菌株，对红火蚁进行致病力测定。结果表明，在1×10<8>孢子/mI，的浓度处理后，04菌株第15d的累计死亡率最高，为70.60％，因此04菌株被确定为10个菌株中的优良菌株。
(2)寄生红火蚁虫生真菌高致病力菌株的筛选：用分离自红火蚁的淡紫拟青霉04菌株(P104)、4株不同来源的球孢白僵菌菌株(Bb01、Bb02、Bb03、Bb04)和一株绿僵菌菌株(Ma01)对红火蚁工蚁进行生物测定。结果表明：P104、Bb01、Bb02、Bb03、Bb04、Ma01对红火蚁工蚁的致死中浓度(LC<,50>)分别为2.23×10<6>、4.07×10<4>、1.77×10<4>、4.80×10<4>、3.71×10<4>、4.46×10<5>孢子/mL，在浓度为10<8>孢子/mL时的致死中时(LT<,50>)分别为8.75、4.73、2.84、4.05、2.55和3.04d。综合分析得出，分离自桔小实蝇的白僵菌菌株Bb04对红火蚁工蚁具最低的致死浓度和最短的致死时间，具较强的致病力和致死速度，是红火蚁微生物防治的优良菌株。
(3)白僵菌Bb04菌株对红火蚁幼虫及蛹的致病力测定：用1×10<4>、1×10<5>、1×10<6>、1×10<7>、1×10<8>孢子/mL的Bb04菌株孢子悬浮液处理红火蚁幼虫和蛹，第10d幼虫和蛹的累计死亡率分别为47.78％、61.11％、76.67％、80.00％、100％和85.56％、94.44％、95.56％、98.89％、100％，显著高于对照的16.00％和28.67％。死亡的幼虫及蛹表面呈粉红色，在体视镜下观察有干瘪的现象，经保湿培养体表有白僵菌菌丝及孢子长出。除感染直接接受白僵菌孢子处理的幼虫和蛹外，处理组中未接受孢子处理的育幼工蚁也有死亡的现象。在幼虫处理组中，以上5种浓度下育幼工蚁第10d的累计死亡率分别为9.33％、15.33％、22.00％、24.67％、44.67％，除10<4>孢子/mL处理外，均显著高于对照(6.67％)。在蛹处理组中，以上5种浓度下育幼工蚁第10d的累计死亡率分别为9.33％、12.67％、14.67％、16.67％、36.00％，除10<4>和10<5>孢子/mL处理外，均显著高于对照(6.00％)。说明白僵菌可以通过不同品级蚂蚁间的交哺作用和身体接触在蚁群中水平传播。
(4)温度对Bb04菌株致病力的影响：在不同温度条件下白僵菌对红火蚁工蚁的致病力有很大差异。当浓度为10<8>孢子/mL时，在21℃、25℃和29℃条件下，红火蚁工蚁在15d的累计死亡率均达到了100％，在17℃和33℃下分别为99.36％和98.74％。当浓度为10<5>孢子/mL时，21℃、25℃、29℃和33℃条件下，红火蚁工蚁在15d的累计死亡率分别为29.42％、36.18％、33.17％和27.21％，显著高于17℃的累计死亡率。在17～25℃范围内，白僵菌对红火蚁工蚁的致死中时(LT<,50>)随着温度的升高而缩短。在10<8>孢子/mL浓度下，处理温度为17、21、25℃时， LT<,50>分别为5.41、3.88、2.57d。当温度为29℃和33℃时，红火蚁的LTso不减少反而增加，分别为2.97d和5.11d。结果表明，在25℃～29℃条件下白僵菌Bb04菌株对红火蚁工蚁的致病力最强，25℃白僵菌的致死速率最快。
(5)白僵菌Bb04菌株在红火蚁人工蚁巢中的传递作用研究：用1×10<8>孢子/mL浓度的孢子悬浮液处理红火蚁工蚁1d后，将接菌工蚁和未接菌工蚁以不同比例(接菌工蚁分别占蚂蚁总数的0～100％)混和饲养，15d后检查不同处理中蚂蚁的总存活率和白僵菌从接菌工蚁到未接菌工蚁的传染率。结果表明，随着接菌蚂蚁比例的增加，蚂蚁的总存活率呈逐渐下降的趋势，而传染率则呈逐渐上升的趋势。当接菌的蚂蚁数量占蚂蚁总数5％、15％、50％时，白僵菌在红火蚁工蚁之间的传染率分别为69.68％、76.71％和82.00％。在接菌蚂蚁数量占蚂蚁总数85％的情况下，白僵菌在红火蚁工蚁之间的传染率达到了100％。
(6)白僵菌Bb04菌株在土壤中对红火蚁的致死情况：将蚁巢中的土壤拌入两种剂量的白僵菌孢子(0.1g和1g孢子粉/100g土壤)，测定白僵菌处理土壤对红火蚁的致病能力。结果表明，在土壤预先进行灭菌的条件下，两种孢子剂量处理第15d红火蚁的死亡率分别为82.00％和93.22％，均显著高于对照(28.71％)。在土壤预先未进行灭菌的条件下，两种孢子剂量处理第15d红火蚁的死亡率分别减少到54.63％和62.27％，尽管显著高于对照(31.96％)，但却显著低于土壤预先进行灭菌处理下的死亡率，其原因可能是土壤中的微生物对白僵菌产生了抑菌作用。