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目的:通过监测血清GnRH、LH、T及垂体组织LHβmRNA、LHβprotein在低血糖应激后的动态变化,探讨低血糖应激(acute hypoglycemia stress)对大鼠下丘脑-垂体-性腺轴(HPG)的影响。 方法:42只8周龄雄性Sprague Dawley大鼠,体重280-320g,随机分为0分钟组(只进行置管而不给予低血糖应激,即为对照组)、15分钟组、30分钟组、60分钟组、90分钟组。实验大鼠均于麻醉状态下行颈动静脉插管术,钳夹试验于插管术后16-24小时内进行,对照组不行钳夹试验直接进行标本采集,实验组通过钳夹试验建立低血糖动物模型(血糖2.2~2.8mmol/L),分别于低血糖持续15分钟、30分钟、60分钟、90分钟后行心脏采血,采血后立即断头,迅速分离并取出垂体。采用ELISA法测定各组大鼠血清GnRH、LH、T水平,实时荧光定量PCR法分析各组大鼠垂体组织LHβmRNA表达水平,Western Blot法分析各组大鼠垂体组织LHβprotein的表达。应用SPSS22.0软件处理和分析数据,实验数据以(X)±SD表示,使用单因素方差分析,P<0.05为差异有统计学意义。 结果:1、低血糖应激各组间血清GnRH水平无统计学差异。2、低血糖应激15分钟后血清LH升高并达到高峰,较0分钟组有显著差异(p<0.05);60分钟组血清LH较15分钟组、30分钟组均显著降低(p<0.05),较0分钟组轻度升高(无统计学差异);90分钟组血清LH进一步下降,较0分钟组明显降低(p<0.05)。3、低血糖应激15分钟后血清T升高并达到高峰,较0分钟组有显著差异(p<0.05);30分钟组血清T较15分钟组轻度降低(无统计学差异),较0分钟组显著升高(p<0.05);90分钟组血清T进一步下降,较15分钟组、30分钟组显著降低(p<0.05),但基本恢复基线水平。4、低血糖应激15分钟后垂体LHβmRNA表达水平升高并达到高峰,较0分钟组有显著差异(p<0.05);60分钟组LHβmRNA表达水平较15分钟组、30分钟组均显著降低(p<0.05),较0分钟组轻度降低(无统计学差异);90分钟组LHβmRNA表达水平较15分钟显著降低(p<0.05),但基本恢复基线水平(无统计学差异)。5.垂体LHβprotein变化与垂体LHβmRNA变化基本一致。 结论:1、低血糖应激能影响大鼠HPG轴。2、低血糖应激对血中GnRH水平无明显影响。3、低血糖应激可引起大鼠血清LH水平先上升后下降。4、低血糖应激可引起大鼠血清T水平先上升后下降,90分钟基本恢复基线水平。5、低血糖应激可引起大鼠垂体LHβmRNA表达水平先增加,90分钟基本恢复基线水平。6.垂体LHβprotein变化与垂体LHβmRNA变化基本一致。