【摘 要】
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苯酚及其衍生物是一类天然的或人工合成的芳香化合物,释放到环境后对人类健康和农作物的生长均造成不利影响.从炼油废水中分离到一株苯酚降解菌,能够在以苯酚为单一碳源和能
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苯酚及其衍生物是一类天然的或人工合成的芳香化合物,释放到环境后对人类健康和农作物的生长均造成不利影响.从炼油废水中分离到一株苯酚降解菌,能够在以苯酚为单一碳源和能源的无机培养基上生长,最高苯酚降解率为394纳摩尔苯酚/分钟.毫克蛋白.采用Biolog细菌自动鉴定仪对该菌进行95底物代谢指纹图谱分析.根据苯酚羟化酶基因高度保守序列设计一对特PCR引物.采用该引物从苯酚降解菌醋酸钙不动杆菌PHEA-2的总DNA中扩增到一条大小为684bp的特征片段.采用lambda噬菌体载体,构建了PHEA-2的基因文库.采用具有高步接合转移特性的Tn5-mob自杀质粒,构建了Tn5:mphKLMNOP重组质粒,定名为pAX7851.在含低浓度苯酚的MS培养液中,重组菌PHEA-21在9h内基本上将苯酚全部降解掉,而野生型PHEA-2需15h才能完全降解溶液中的苯酚;在含高浓度苯酚的MS培养液中,野生型PHEA-2在接种24h后对苯酚的降低效率极低,需培养36h后主能将溶液中的苯酚完全降解,而重组菌PHEA-21在相同的条件下培养24h内则可将溶液中的苯酚完全降解掉.野生型P.putidamt-2和重组菌MTP-21分别在含有2mmol/L苯酚的A15限制性平板上均能良好生长,但MTP-21培养48h后可产生一种黄色的中间代谢产物.
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