REG IV基因在结肠癌HCt-8细胞增殖、侵袭和转移中的作用及临床意义研究

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目的:探讨人再生基因Ⅳ(Regenerating geneⅣ,REGIV)在结肠癌细胞系HCT-8中的表达,以及对结肠癌HCT-8细胞增殖、侵袭和转移中的影响及临床意义。   方法:采用基因克隆和基因重组等分子生物学方法,从结肠癌细胞系HCT-8克隆REGⅣ基因,构建全序列过表达REGⅣ质粒,并转染至HCT-8细胞。通过MTT、细胞侵袭和转移实验,观察HCT-8细胞过表达REGⅣ基因后对细胞增值、侵袭和转移的影响。并观察HCT-8细胞经转染沉默REGⅣ基因的小干扰RNA质粒(REGⅣRNAi-2),对细胞增值、侵袭和转移的影响。   结果:通过酶切、测序与比对,REGⅣ基因的全序列质粒构建成功。通过荧光显微镜观察计数,转染REGⅣ基因的HCT-8细胞转染率为±55%,且REGⅣ mRNA表达显著增加(P<0.05),REGⅣ蛋白表达显著增高(P<0.05);转染REGⅣ基因质粒后,HCT-8细胞增殖能力显著增强,表现为细胞数量明显增加(P<0.05)、细胞PCNA的表达显著增高(P<0.05);HCT-8细胞经转染REGⅣ基因质粒后,其转移和侵袭能力也明显增强(P<0.05)。但HCT-8细胞转染特异性阻断REGⅣ基因的小干扰RNA REGⅣ RNAi-2质粒,HCT-8细胞的REGⅣ mRNA的明显下降(P<0.05),其蛋白表达也显著降低(P<0.05),同时其细胞增殖能力明显减弱(P<0.05),转移和侵袭能力也明显降低(P<0.05)。   结论:REGⅣ基因可调控结肠癌细胞的增殖、转移和侵袭能力,该基因可能在结肠癌的发生、发展中具有重要的作用和临床意义。
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