新型荧光标记物CdSe量子点的合成及其对蛋白的标记应用研究

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本研究采用有机溶剂热法合成了平均粒度为2~5 nm的系列半导体CdSe量子点,探讨了体系反应时间、温度、体系传质传热等因素对所制备的纳米粒子的粒度分布、荧光性质的影响。分别采用巯基硅烷和脑磷脂接枝的聚丙烯酸对合成的油溶性CdSe量子点表面进行化学修饰,研究了两种修饰方法对CdSe量子点荧光量子产率的影响。得到了两种带有不同表面活性基团(-NH2或-COOH)、水溶性良好、稳定性高、荧光量子产率高的CdSe量子点荧光标记材料。利用两种不同尺度的水溶性CdSe量子点分别与NFkB抗原蛋白及其抗体蛋白进行结合,实现了蛋白的荧光标记。观察了标记后蛋白的荧光图像以及抗原抗体蛋白的状态及结合情况。结果表明,采用合适的剂量的CdSe量子点对抗原抗体蛋白进行标记,没有影响到蛋白的免疫化学活性,标记方法行之有效。研究过程中,分别采用透射电子显微镜(TEM)、扫描电子显微镜(SEM)、原子力显微镜(AFM)和荧光显微镜对CdSe量子点进行了形貌观察和分析,采用紫外-可见光光谱仪、荧光光谱仪对CdSe量子点进行了光学性质分析,采用X射线电子能谱仪(XPS)对CdSe量子点及其修饰成分进行了价态分析,探讨了修饰成分巯基硅烷中硫的价态与量子点荧光性质的关系。
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