传统中药是中华民族几千年灿烂文化的瑰宝，它以自己独特的功效和理念被人们所接受，但由于大多中药制剂中的有效成分尚不明确，加上对其药理作用的研究和开发相对薄弱，是中药的开发和利用收到了限制。因此提取中药有效成分并对其进行纯化和分离，得到高纯度单体化合物是中药研究中的一项重要内容，每种中药的成分和种类都十分复杂多样，且各部分含量高低不同，所以对中药活性成分的提取、分离和纯化是一项艰巨而复杂的工作。而逆流色谱（Counter-CurrentChromatography,CCC）作为一种连续高效的液-液分配色谱技术，有着分离速度快、进样量大、样品回收率低等优点，对中药及天然产物中有效成分的研究特别有效。罗布麻花为夹竹桃科罗布麻属植物罗布麻(Apocynum venetum Linn.)的干燥花蕾，玫瑰花是蔷薇科植物玫瑰（rosa rugosa）的干燥花蕾，两者中均含有丰富的黄酮类化合物。黄酮类化合物作为中药中最为重要的活性成分之一，具有广泛的药理活性，能起到抗氧化、抗抑郁、降血压、降血脂等作用。本文建立了从罗布麻花和玫瑰花中纯化分离黄酮类化合物的方法，对于中药黄酮产物的研究开发具有一定意义，为天然产物中黄酮类化合物的研究和开发提供了理论和技术依据。本实验利用加热回流法分别对罗布麻花和玫瑰花中总黄酮类化合物进行了提取，然后通过大孔树脂对各自总黄酮粗提物进行进一步的富集和纯化，再利用高效逆流色谱分离两种不同粗提物，最终在罗布麻花粗提物中得到十个高纯度化合物，在玫瑰花中得到六个高纯度单体化合物，并应用高效液相色谱（HPLC）、多级串联电喷雾质谱（MSn）、核磁共振波谱（NMR）等技术对目标化合物的纯度和化学结构进行了分析和鉴定。同时对采用经典抗抑郁评价模型对两种药材总黄酮提取物进行抗抑郁活性评价，结果表明表明罗布麻花和玫瑰花总黄酮提取物具有明确的抗抑郁活性。1、HPCCC分离纯化罗布麻花粗提物建立了HPCCC一次性分离纯化罗布麻花的新方法，以乙酸乙酯–乙腈–水–冰醋酸（5:3:5:0.05, v:v:v:v）作为两相体系，从80mg罗布麻花粗粉中一步分离纯化出5.4mg白麻苷、12.8mg为山奈酚-3-O-吡喃葡萄糖基(2→1)-吡喃葡萄糖苷、17.3mg大波斯菊苷、6.6mg异槲皮素、10.7mg香草酸、5.5mg胡萝卜苷，纯度分别为98.51%、98.50%、98.49%、93.44%、91.15%、92.66%，实验条件流动相流速为1.2mL/min，在254nm的紫外波长下检测，主机转速设定为1400rpm/min，柱温30℃。2、HPCCC分离纯化玫瑰花粗提物应用HPCCC从100mg玫瑰花粗提物中一次分离到十三种化合物，其中六种单体纯度较高，它们分别是芦丁（99.9%）、矢车菊素-3-槐糖苷-5-葡萄糖苷（99.9%）、矢车菊素-3,5-二葡萄糖（99.9%）、矢车菊素-3-葡萄糖（100%）、槲皮素（87.34%）和山奈酚（89.28%），实验条件为乙酸乙酯-正丁醇-乙腈-水(5:0.5:2.5:5,v:v:v:v)作为两相体系，上相为固定相、下相为了流动相，流动相流速为1.2mL/min，在254nm的紫外波长下检测，主机转速设定为1400rpm/min，柱温30℃。3、罗布麻花总黄酮提取物和玫瑰花总黄酮提取物的抗抑郁活性评价研究采用经典抗抑郁评价模型小鼠实验对两种药材总黄酮进行抗抑郁活性评价。试验中给小鼠罗布麻花总黄酮提取物50mg/kg、100mg/kg和200mg/kg和玫瑰花总黄酮提取物100mg/kg、200mg/kg和300mg/kg均能显著缩短小鼠强迫游泳不动时间(P<0.05),药效与阳性对照药盐酸氟西汀相似。