【摘 要】
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一、SD大鼠下颌骨放射性骨坏死动物模型的建立研究目的:建立良好、高效、稳定的SD大鼠下颌骨放射性骨坏死的动物模型,为深入研究下颌骨ORN的发病机制奠定基础。研究方法:将24只雄性SD大鼠,随机分成四组,每组6只:a.正常对照组;b.单纯拔牙组;c.单纯放射组;d.放射拔牙组。c、d两组大鼠以6MV-X线单次35Gy照射右侧下颌骨。照射后15天,b、d两组采用口外路径,拔除右下颌所有磨牙。定期观察S
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一、SD大鼠下颌骨放射性骨坏死动物模型的建立研究目的:建立良好、高效、稳定的SD大鼠下颌骨放射性骨坏死的动物模型,为深入研究下颌骨ORN的发病机制奠定基础。研究方法:将24只雄性SD大鼠,随机分成四组,每组6只:a.正常对照组;b.单纯拔牙组;c.单纯放射组;d.放射拔牙组。c、d两组大鼠以6MV-X线单次35Gy照射右侧下颌骨。照射后15天,b、d两组采用口外路径,拔除右下颌所有磨牙。定期观察SD大鼠一般表现,照射后90天从各组分别取右下颌骨进行CBCT、Micro-CT影像学检查,HE染色、Masson染色组织形态学观察。研究结果:1、大体观察:照射后90天,a、b、c三组未出现明显异常,b组中拔牙创面于拔牙后两周正常愈合。d组在放射后一个月,拔牙创未愈,死骨暴露,部分SD大鼠出现颌面部皮肤瘘管或洞穿性缺损。照射结束后90天,d组中体重较其他组别明显降低,存在统计学意义(p<0.05)。2、CBCT、Micro-CT结果:CBCT观察到骨质破坏、皮质骨不连续,Micro-CT不但观察到死骨形成,而且可见病理性骨折。d组骨密度较a、b、c明显降低,存在统计学意义(p<0.05)。3、组织切片检查显示:板层骨断裂,骨细胞消失,后期纤维化修复。结论:采用临床放疗常用的3D-CRT技术,单一35Gy剂量照射SD大鼠下颌骨结合拔牙创伤,能建立稳定的下颌骨放射性骨坏死模型,可用于放射性骨坏死发病机制等方面的研究。二、下颌骨放射性骨坏死SD大鼠骨代谢的机制研究研究目的:在SD大鼠下颌骨放射骨坏死动物模型建立基础上,检测不同时间点骨代谢相关基因VEGF、RUNX2、RANKL、OPG的表达情况并观察形态学变化,探讨下颌骨放射性骨坏死可能机制。研究方法:取144只SD大鼠,随机分为四组,每组36只,分组方法同实验(一)。在放射后4、9、15、30、45、90天六个时间点取材。观察组织病理形态学变化;RT-q PCR、WB方法观察骨代谢相关基因VEGF、RUNX2、OPG、RAKNL的变化。研究结果:1.HE染色:d组在照射前期出现成骨和破骨并存现象,以成骨改建为主,后期出现骨不良炎症修复,c组在同时期则出现缓慢的骨再生,b组在拔牙后出现成骨性修复。2.VEGF表达:b组中VEGF的表达量与正常对照组无明显差异,c、d组中VEGF表达低于正常对照组。3.RUNX2表达:d组的表达水平在9天达到峰值,尔后急速下降,在45天时表达到达最低点;c组的表达量呈现双峰状态,9、30天时表达明显增高;b组RUNX2的表达量在45天后出现明显增高;在第4、9天同一个时间点c、d两组表达量高于b组,45天时间点d组表达量低于c、b组,亦低于正常对照组。4.RANKL/OPG比值:d组比值在4天时即出现降低,第45天时,比值达到顶点;c组变化趋势与d组相似;b组在30天时达到峰值,随后下降;在4、9、15天同一个时间点上b、c、d三组的比值无明显差异,在45天b、c、d比较存在统计学差异,其中d组最高,c组次之,b组最低。结论:放射后引起的VEGF低表达,血管功能损伤、代谢障碍贯穿始终,放射后前15天以新骨形成为主,15天后骨吸收加剧,拔牙创伤会加重ORN骨代谢失衡,促进ORN的发生。
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