猪乳铁蛋白的酶联免疫吸附分析和肝素亲和层析纯化

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该研究建立了检测乳铁蛋白的酶联免疫分析方法(ELISA),并利用此方法检测了二花脸母猪在泌乳期中乳中乳铁蛋白的含量;利用肝素亲和柱从猪乳中分离得到了猪的乳铁蛋白,并与人乳和牛乳的亲和层析行为进行了比较.1.检测乳铁蛋白的酶联兔疫分析方法(EL1sA)的建立;2.二花脸母猪泌乳期乳中乳铁蛋白分泌规律的研究;运用建立的竞争抑制性ELlsA方法,测定了二花脸母猪在泌乳期乳中乳铁蛋白的分泌规律.3.猪乳铁蛋白的肝素亲和层析纯化;利用二花脸母猪的初乳作为分离乳铁蛋白的原料,将猪乳在4℃以2000g离心40分钟,脱去乳脂.调节脱脂乳的pH到4.6,等电点沉淀酪蛋白,然后离心除去.将乳清上肝素亲和柱,利用肝素和乳铁蛋白有很强亲和力的特性分离乳铁蛋白.改变缓冲液中的离于浓度,将与肝素结合的乳铁蛋白洗脱下来.利用电泳、RISAT 和Western B1ot鉴定洗脱产物.得到了纯度较高的乳铁蛋白.
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