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目的：通过研究细菌脂多糖(lipopolysaccharide，LPS)对人角膜上皮细胞系(hunmancornealepithelialcellline，HCEC)和角膜基质成纤维细胞(hunmancornealfibroblasts，HCF)Toll样受体(toll-likereceptors，TLRs)的表达和功能的影响，以及糖皮质激素对这种影响的调控，探讨TLRs及糖皮质激素在角膜细菌感染中的可能作用。
方法：首先通过RT-PCR.及quantitativeReal-TimePCR检测HCEC和HCF中TLRs在mRNA水平的表达；然后在两种细胞的培养液中加入三种浓度的LPS(1，10，100ng/ml)共培养48小时，通过Real-TimePCR检测此时两种细胞TLRs的表达；以及在此基础上，选择在10ng/mlLPS刺激的两种细胞的培养液中加入三种浓度的氢化可的松(1，10，100μg/ml)进行干预，并检测此种情况下两种细胞ILRs的表达。再用酶联免疫吸附实验(enzyme-linkedimmunosorbentassays，ELISA)来检测以上三种情况下两种细胞培养液中IL-6、IL-8的释放。并且通过免疫荧光组化来检测TLR2、TLR4在蛋白水平的表达。
结果：TLRL-10mRNA在HCEC和HCF均有表达，且表达量各不相同。LPS能增加两种细胞TLRsmRNA的表达，以TLR2、4mRNA增加最明显，且当LPS为10ng/ml时TLRs的表达量最高，同时IL-6、IL-8的释放也相应增高。在10ng/mlLPS刺激的HCEC和HCF培养液中加入不同浓度的氢化可的松干预后，随着激素浓度的增加，HCEC中ILRsmRNA的表达也随之增加，此时IL-6的释放减少，IL-8的释放增加；但HCF中TLRsmRNA的表达却随激素浓度的增高而下降，并且此时IL-6和IL-8的释放均下降。免疫荧光组化也显示了三种情况下HCEC和HCF的TLR2、TLR4在胞内均有表达，且强度不同，趋势与分子水平的表达一致。
结论：TLR1-10mRNA在HCEC和HCF均有表达，不同的TLRs在同一细胞的表达量不同，而同一TLR在两种不同细胞的表达量也不同。LPS能改变两种细胞TLRsmRNA的表达，提示两种细胞表达的TLRs与角膜抵御细菌的固有免疫密切相关；糖皮质激素可以调控LPS刺激的HCEC和HCFILRs的表达，即对LPS刺激的HCECTLRs的表达表现轻度促进，而对LPS刺激的HCFTLRs的表达表现出抑制；提示在细菌侵袭角膜的早期，糖皮质激素可能具有一定的免疫促进作用；而当细菌的侵袭突破角膜上皮到达基质时，糖皮质激素的作用则变成了免疫抑制的作用。