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牡蛎是我国重要的经济贝类,具有很高的营养价值和保健价值,牡蛎富含人体所需多种微量元素,尤其是锌含量十分丰富。牡蛎同一群体的不同个体间的锌含量有很大差别,但其分子机制迄今尚未阐明。本文研究了福建牡蛎(Crassostrea angulata)几种锌富集相关基因与锌富集的关系,研究结果可为解析牡蛎对锌的高富集及个体富集差异的分子机制提供新资料。主要研究结果如下: 1、利用cDNA末端快速扩增技术(rapid-amplication of cDNA ends,RACE)扩增福建牡蛎锌富集相关基因cDNA全长。在福建牡蛎中获得三个ZIP超家族同源基因ZIP1L-a、ZIP1L-b、ZIP1L-c以及一个ZnT超家族同源基因ZnT2L。ZIP1L-a、ZIP1L-b和ZIP1L-c具有明显保守区域,且蛋白可变区均位于第Ⅲ个和第Ⅳ个跨膜结构域之间,该可变区很可能是金属离子结合位点,参与金属离子的转运和调控。ZnT2L也具有很多保守区域,其中TMDⅣ和Ⅴ之间的一段富含组氨酸残基的长环结构(Long loop region)与TMDⅡ和Ⅴ上组氨酸-天冬氨酸残基对形成的四面体锌结合位点参与锌离子转运。 2、锌暴露(500ppb)条件下,利用qPCR方法检测到ZIP1L-a mRNA表达水平在外套膜中并不受锌的调控影响,在鳃和闭壳肌中会有短暂上调。ZIP1L-bmRNA在鳃中不受锌的调控影响,在外套膜和闭壳肌中会有上调现象。ZIP1L-c和ZnT2L mRNA均在外套膜和鳃中不受锌调控,在闭壳肌中会有短暂上调。 3、ZIP1L-a基因经过RNA干扰后,测定其外套膜和鳃中锌含量但并没有发现锌含量有显著变化。推测除ZIP1L-a在外套膜和鳃中参与锌转运外,或许还有其他一些广泛表达ZIP家族成员如ZIP3、ZIP6等在外套膜和鳃中发挥同样的作用。