【摘 要】
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目的:神经营养蛋白3(Neurotrophin 3,NTF3)在许多生物学过程中发挥作用,尤其是对于神经元细胞的存活与分化。但是,关于NTF3在实体肿瘤中的研究内容不多,目前也尚未有报道其在
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目的:神经营养蛋白3(Neurotrophin 3,NTF3)在许多生物学过程中发挥作用,尤其是对于神经元细胞的存活与分化。但是,关于NTF3在实体肿瘤中的研究内容不多,目前也尚未有报道其在肝细胞癌(Hepatocellular carcinoma,HCC)中的作用。随着生物信息技术的不断更新与发展,这项研究通过大数据分析得到NTF3在肝癌中的表达量以及生存预后。对NTF3设置不同的表达水平进行体外实验,研究NTF3在HCC进展中的功能,并揭示了其潜在的分子机制。方法:通过对公开获取的肿瘤基因组图谱(The Cancer Genome Atlas,TCGA)数据库进行生物信息学分析,发现NTF3在肝癌组织及与其对应的癌旁组织中的表达量及预后相关性分析。取80例临床标本利用实时定量PCR(Quantitative real time polymerase chain reaction,qRT-PCR)检测技术用于验证NTF3在肝癌中的表达水平,同时将HCC组织的石蜡标本进行免疫组织化学研究(immunohistochemistry,IHC)用以察看NTF3的表达量。通过细胞计数试剂盒(Cell Counting Kit-8,CCK-8)对细胞的生长和增殖进行分析。细胞的侵袭和迁移通过Transwell小室和伤口愈合测定法(Wound Healing)进行分析。通过免疫印迹实验(Western Blot)和qRT-PCR检测(n=80)以评估蛋白质的表达量和m RNA水平。通过流式细胞术评估细胞凋亡。结果:TCGA数据库显示与邻近的非肝癌组织(adjacent nontumorous liver tissue,ANLT)相比NTF3在肝细胞癌组织中的表达水平下调明显,差异具有统计学意义(P<0.001)。而NTF3的较低表达与患者总体生存期降低明显相关,qRT-PCR和IHC结果显示HCC组织中NTF3的表达总体较低。NTF3过表达减少了HCC细胞系的增殖,迁移和侵袭。NTF3的较低表达与临床病理特征有明显相关性。结论:根据TCGA数据库分析以及临床样本验证均表明,NTF3在肝癌组织中表达量明显较低,而低表达NTF3可以通过促进HCC细胞增殖、迁移和侵袭而参与HCC患者的不良预后。本实验的研究结果为HCC的发病机理和NTF3在肿瘤进展中的作用提供了新的认识,表明靶向NTF3对于HCC治疗具有潜在的治疗和诊断价值。并且为肝癌以后的研究提供了实验依据。
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