荧光假单胞菌2P24中RpoZ对抗生素合成基因及群体感应系统的调控作用

来源 :内蒙古农业大学 | 被引量 : 1次 | 上传用户:dl612
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Pseudomonas fluorescens2P24是从小麦全蚀病的自然衰退土壤中分离出来的,它可以有效防治多种植物病原菌、细菌引起的土传病害。P. fluorescens2P24可产生多种次生代谢物,如抗生素2,4-二乙酰基间苯三酚(2,4-Diacetyphlorogulucinol,2.4-DAPG)、嗜铁素、蛋白酶和氢氰酸等,这些次生代谢物质在植物病害生物防治中起着重要作用,其中2,4-DAPG占其主要作用,它是一种广谱性抗生素。GacS/GacA双因子调控系统对于抗生素的合成、HCN以及胞外酶的产生有重要的调节的作用。PcoI/PcoR群体感应系统(Quorum Sensing, QS)在番茄青枯病与小麦全蚀病的生物防治方面发挥着重要的功能,并且参与小麦根部定殖与生物膜的形成。为深入地了解P.fluorescens2P24防治病害的机理,本研究利用遗传学方法对该菌产生的抗生素2,4-DAPG的合成以及该菌内的QS系统进行深入的研究。本研究以含有phlA-lacZ转录融合的报告质粒菌株PM901为出发菌株,利用Tn5转座子来筛选调控2,4-DAPG合成基因phlA表达的调控因子。从10,000株的突变体中,共筛选到21株突变菌株,经测定表明,突变菌株中phlA基因的表达与野生菌株相比明显不同,其中突变菌株Aa4-29phlA基因的表达明显降低,对其Tn5转座子的侧翼序列进行克隆后分析发现,突变菌株Aa4-29破坏了rpoZ基因,在很多细菌中是编码omiga亚基RpoZo本研究结果表明,在P.fluorescens2P24中,rpoZ对2,4-DAPG抗生素的合成基因phlA基因与PcoI/PcoR QS系统信号的合成基因pcol基因的表达在转录水平上有正调控作用,从而影响到2,4-DAPG抗生素与信号分子AHL的产生。rpoZ对于不翻译的小分子RNA的表达转录没有影响,但是却对RsmA蛋白的表达有影响,另外对rpoS基因也有一定地调控作用。温室生物测定试验表明,利用rpoZ基因缺失菌株防治棉花立枯丝核菌,结果rpoZ基因缺失菌株相对于野生菌株2P24防治能力显著下降,这说明rpoZ基因参与调控菌株P.fluorescens2P24的生防能力。在菌株2P24中,QS系统参与根围的定殖、生物膜的形成等,rpoZ基因正调控QS系统,所以rpoZ是通过QS系统影响根围的定殖能力、生物膜的形成而影响生防能力。
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