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司帕沙星（Sparfloxacin，SPFX），是一种抗菌活性强、具有代表性的氟喹诺酮类抗生素药物，广泛应用于治疗呼吸道、尿路、肠、胆道、皮肤和软组织感染；司帕沙星在水产养殖也大有用途，能促进黄鳝等快速生长。但是易在动物脏器等组织中形成累积性残留的司帕沙星，主要通过人们熟知的食物链进入到人体，严重影响甚至危害到人类健康。本着控制氟喹诺酮类药物的滥用，保障动物性食品安全和关心大众健康的宗旨，国内和国外已经开发出有效的检测方法，用于监测其动态发展，但传统的检测和监测手段相对落后，因此，建立快速、便捷、经济实惠的检测方法是满足监督、监控司帕沙星滥用的迫切需要。本论文对司帕沙星免疫学特性进行分析和研究，运用单克隆抗体技术制备抗司帕沙星的单抗，开发了司帕沙星快速检测的工具即试剂盒，主要研究结果如下：1.司帕沙星人工抗原的制备与鉴定根据司帕沙星（SPFX）的化学结构和理化性质，采用混合酸酐法和DCC法，将SPFX和载体牛血清白蛋白（BSA）偶联，合成免疫原SPFX-BSA，用DCC法将SPFX和卵清蛋白（OVA）偶联，合成包被原SPFX-OVA。对人工合成抗原鉴定主要通过紫外扫描法（UV）、凝胶电泳法（SDS-PAGE）和免疫小鼠获得多克隆血清的ELISA方法进行鉴定。紫外扫描图谱显示，合成的人工抗原的最大紫外吸收峰发生明显的位移；SDS-PAGE结果表明免疫原的泳动速度慢于载体蛋白，说明与载体蛋白相比，免疫原的分子量要相对较大；免疫小鼠后所获得的血清对SPFX具有明显的敏感性，最终说明SPFX与BSA偶联成功，同时实验结果还证明用混合酸酐法合成的免疫原免疫效果优于DCC方法。2. SPFX单克隆抗体的制备及免疫学特性鉴定用SPFX-BSA对4只BALB/C小鼠进行免疫，经检测，选出1只血清效价高、抑制价好的小鼠成为细胞融合小鼠，利用杂交瘤技术将能分泌SPFX抗体的免疫小鼠脾细胞与能大量繁殖生长的NS0瘤细胞进行相互融合，获取能分泌SPFX单克隆抗体(mAb)的细胞株。经检测、筛选、克隆化等系列程序后，获得一株特异敏感性都较好的杂交瘤细胞株，命名为4H4C8。用体内诱生腹水的方法生产得到SPFX mAb，经过鉴定，4H4C8对SPFX的IC50为27.63ng/mL，与其他同系物或化合物没有出现明显的交叉反应。本实验制备的SPFX mAb能用于检测动物源性食品中SPFX的残留。3.司帕沙星免疫快速检测试剂盒的研发依据ELISA原理，在本研究所制备的SPFX mAb的基础上，优化各个实验条件，研制可以应用于司帕沙星残留检测的间接竞争ELISA试剂盒（SPFX-Kit)。此SPFX-Kit检测所用时间不长，具有检测速度快、检测线低、特异性好、便于携带等特点，对动物源性食品中司帕沙星残留的定性和半定量检测起到重大作用。