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目的:了解本地区变形杆菌的耐药现状,指导临床合理用药。本研究收集了来自安徽省细菌耐药中心的125株变形杆菌,分析其抗生素敏感性、超广谱β-内酰胺酶产生率及所产ESBLs的基因型别。
材料与方法:
收集2004年1月至2005年5月间安徽省细菌耐药中心的125株变形杆菌。对所有菌株使用美国MicroScan WalkAway-40全自动细菌鉴定药敏分析仪进行鉴定药敏试验。
对所有菌株进行超广谱β-内酰胺酶的初筛和确证实验,按2005年NCCLS(现更名为Clinical and Laboratory Standards Institute,CLSI)的标准读取结果。
用根据GenBank的基因序列设计(沈断录博士)的TEM组、SHV组、CTX-M组、OXA组和TOHO组,共8对通用引用分别对临床分离的产ESBLs的奇异变形杆菌进行PCR扩增。然后对通用引物扩增阳性者进行CDS全长引物的PCR扩增。同时对PCR阳性菌株进行质粒的转移接合实验。
微量稀释法分析125株变形杆菌对13种抗菌药物的MIC,了解产ESBLs菌株的耐药情况。
结果:
MicroScan药敏结果显示变形杆菌对青霉素类的氨苄西林(AMP)和哌拉西林(PIP)的耐药率分别为64.6%和32.0%;对氨苄西林/舒巴坦(AMP/SUL)和哌拉西林/他唑巴坦(PIP/TAZ)的耐药率分别为59.6%和4.2%。变形杆菌对一、二代头孢菌素头孢噻吩、头孢唑啉和头孢呋肟的耐药率依次为29.4%、27.7%和25.4%。变形杆菌对三、四代头孢菌素的耐药率均在17%以下,依次为头孢他啶(10.3%)、头孢曲松(14.9%)、头孢噻肟(15.3%)和头孢吡肟(16.3%),其中头孢他啶的耐药率最低。阿米卡星的耐药率为13.0%,远低于庆大霉素(39.7%)和妥布霉素(27.4%)。所有菌株对亚胺培南均敏感。本地区产ESBLs的变形杆菌的检出率为7.2%,以头孢噻肟、头孢他啶、头孢泊肟为底物时检出率分别为60.0%、20.0%、26.7%,头孢噻肟的检出率最高。
除亚胺培南外,产ESBLs菌株的耐药率均显著高于非产ESBLs菌株(P<0.05)。
本地区奇异变形杆菌中流行的是CTX-M型ESBLs (3株为CTX-M-14,1株为CTX-M-3)。据我们所知,国内尚未见报道奇异变形杆菌中CTX-M型ESBLs的流行。此外,TEM-1b广谱β-内酰胺酶也在奇异变形杆菌中普遍存在。
结论:
头孢噻肟在初筛实验和确证实验中均有较高的敏感性,是本地区检测ESBLs的首选。药敏结果提示临床上在治疗变形杆菌引起的感染时,应根据病人具体情况和药敏试验结果区别对待产ESBLs菌和非产ESBLs菌。对非产ESBLs菌,可选用耐药率较低的头孢西丁、头孢曲松、头孢他啶、头孢噻肟、头孢吡肟、阿米卡星及β-内酰胺/β-内酰胺酶抑制剂复合剂类的哌拉西林/他唑巴坦等;对产ESBLs菌,碳青霉烯类的亚胺培南是经验用药的首选。
本研究中奇异变形杆菌产β-内酰胺酶的基因型包括CTX-M14、CTX-M-3和TEM-1b。因为奇异变形杆菌产酶的多样性,多重耐药菌株的出现和增殖将对临床治疗造成直接威胁,更严重的将会引起院内感染的暴发流行。