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HAP是Reticulon(RTN)家族基因,是一个新的人类细胞凋亡诱发基因。由于凋亡机制的保守性,本文从hap是否能诱导大肠杆菌细胞凋亡和其它哺乳动物细胞凋亡两个方面出发对hap的凋亡诱发功能展开研究。首先,构建了原核表达载体,在原核表达HAP蛋白时发现HAP的表达能使大肠杆菌细胞死亡,而对照不能。诱导后的HAP蛋白在30min时可抑制细菌生长。用透射电镜观察显示表达HAP蛋白的细菌形态明显的改变:细胞变长,细胞膜边界变得不清楚。HAP的致死效应可以被维生素E和厌氧条件培养缓解。这些结果显示HAP可诱导细菌细胞死亡。这种死亡与氧自由基(ReactiveOxygenSpeciesROS)相关。为进一步研究凋亡诱发蛋白HAP的功能效应,我们还构建了hap的真核表达载体,将hap的真核表达质粒转染非洲绿猴肾上皮细胞Vero,采用一系列方法(包括光镜下形态学观察,DNA提取及琼脂糖凝胶电泳,AnnexinV/PI双染法及流式细胞仪检测DNA亚二倍体凋亡峰等)检测了HAP蛋白高表达诱导的Vero细胞凋亡。研究结果表明,hap不仅能诱发人类细胞产生凋亡,而且能诱发大肠杆菌和哺乳动物细胞产生凋亡。