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实验目的:观察帕比司他单用及其联合STF083010对食管癌细胞生长增殖的影响,并初步探讨其作用机制。实验方法:采用CCK8法检测药物对食管癌细胞的生长抑制作用;PI单染法检测细胞周期;Annexin V/PI双染色法检测细胞凋亡;Western blot和Quantitative RT-PCR检测药物作用细胞后蛋白及基因表达水平的变化;采用激光共聚焦法检测药物作用细胞后对内质网形态的影响;构建裸鼠移植瘤模型检测药物在体内抗食管癌的效果。实验结果:帕比司他有效抑制对传统化疗药物不敏感的Kyse450和Kyse510食管癌细胞的生长。帕比司他通过增加组蛋白H3和α-微管蛋白乙酰化水平,上调p21和降低c-myc的表达而诱导细胞凋亡和G2/M期周期阻滞。同时,帕比司他诱导细胞产生内质网应激,激活IRE1-Xbp1信号通路。帕比司他与IRE1核酸内切酶抑制剂STF083010联用显著抑制食管癌细胞增殖,大部分两药联合作用指数(CI)<1。与单用帕比司他治疗组相比,帕比司他与STF083010联用组显著抑制IRE1-Xbp1促存活信号通路,抑制依赖HDAC6的聚集小体降解途径,上调内质网应激凋亡标志物DDIT3基因的表达,进而下调Bcl-xL/Bax的比例,激活caspase级联反应,增强PARP切割,从而诱导细胞凋亡。在裸鼠移植瘤模型中,STF083010显著增强帕比司他介导的肿瘤生长抑制及肿瘤细胞坏死的数量。结论:IRE1核酸内切酶抑制剂STF083010在体内外都能够显著促进帕比司他对食管癌增殖的抑制作用,并且促进帕比司他诱导的食管癌细胞发生凋亡。