心脏手术病人体外循环前后血清的差异蛋白质组学研究

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机体在经历体外循环过程后,由于包括补体、缓激肽等多种炎性介质的激活,会出现一种类似“全身性的炎症反应”,并由此引起脏器功能的改变,对心、脑、肺、肾等生命重要器官都会产生不良影响,导致术后出现ARDS、肾功能不全、心律失常、低心排等严重并发症。筛选出经历体外循环过程的心脏手术病人体外循环前后的血清中的差异表达蛋白质,将为研究体外循环相关的病理状态的病理生理学机制以及探讨体外循环相关并发症的预防和治疗方面开拓新的思路。本研究采用血清蛋白质组学技术筛选并鉴定经历体外循环过程的心脏手术病人体外循环前后血清中的差异表达蛋白。采用双向凝胶电泳技术(2-DE)分离心脏手术病人体外循环开始前30 min、体外循环结束后1h、体外循环结束后24h的血清蛋白质,经PDQuest图像分析软件识别差异蛋白质点,切取蛋白质斑点胶块,酶解后再用基质辅助激光解吸/电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)进行分析,数据库查询后对差异表达的蛋白质点进行鉴定,然后应用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测差异表达蛋白质——血清淀粉样蛋白A(Serum amyloid Aprotein,SAA)在健康人、心脏手术病人体外循环开始前30 min、体外循环结束后1h、体外循环结束后24h的血清中的表达情况,并进一步探讨SAA的临床应用前景。采用2-DE联合质谱技术最终成功鉴定了3种差异蛋白质,即触珠蛋白(HPT)、富亮氨酸α-2糖蛋白(A2GL)、血清淀粉样蛋白A(SAA)。ELISA分析结果显示:SAA在心脏手术病人体外循环结束后1h血清中表达水平较体外循环开始前30 min升高了约3倍,SAA在心脏手术病人体外循环结束后24h的血清中表达水平较体外循环开始前30min升高了约19倍,而SAA在健康人和心脏手术病人体外循环开始前30 min的血清中表达水平无显著差异。本研究结果提示:HPT、A2GL、SAA可能与体外循环有关的溶血、组织损伤、炎症等存在关联;HPT可作为判断心脏手术病人溶血严重程度的指标;SAA可作为经历体外循环过程的心脏手术病人术后急性期反应监测的有用的敏感的生化指标。
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