益气养阴散结方对人体肺癌细胞增殖与凋亡影响的研究

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目的:研究益气养阴散结方的药物血清对气阴两虚型肺癌患者的癌细胞增殖与凋亡,及其相关基因增殖性细胞核抗原(proliferation cell nuclear antigen,PCNA)和生存素(Survivin)的影响,探讨益气养阴散结方治疗肺癌的作用及其机制。方法:临床选择气阴两虚型肺癌患者1例,分离其癌细胞体外培养作为研究对象;通过给正常大鼠灌胃制备益气养阴散结方的药物血清,设为含药血清组,正常大鼠血清设为空白血清组,研究不同血清对肺癌细胞的影响。(1)采用噻唑蓝比色分析法(MTT)检测不同浓度药物血清对肺癌细胞增殖的影响;(2)用逆转录-多聚酶链式反应法(RT-PCR)检测药物血清对肺癌细胞PCNA mRNA表达的影响;(3)采用annexin V/PI双染色流式法检测药物血清对肺癌细胞凋亡的影响;(4)用RT-PCR检测药物血清对肺癌细胞Survivin mRNA表达的影响。所有数据均用SPSS12软件进行统计学处理。结果:(1)与空白血清组比较,5%、10%和20%浓度组的含药血清对肺癌细胞的增殖均有明显的抑制作用(P<0.05),其中10%含药血清组的抑制率显著强于5%含药血清组(P<0.05),但20%含药血清组与10%含药血清组比较无显著性差异(P>0.05)。(2)与空白血清组比较,含药血清组肺癌细胞的PCNAmRNA表达明显降低,其差异具有极显著性(P<0.01)。(3)与空白血清组比较,含药血清组肺癌细胞的凋亡率明显增高,其差异具有极显著性(P<0.01)。(4)与空白血清组比较,含药血清组肺癌细胞的Survivin mRNA表达明显降低,其差异具有显著性(P<0.05)。结论:(1)益气养阴散结方药物血清对气阴两虚型肺癌患者的肺癌细胞有显著的抑制增殖和诱导凋亡的作用,这可能是其治疗肺癌的重要机制之一。(2)益气养阴散结方药物血清能降低肺癌细胞PCNA基因的表达水平,这可能是其发挥抑制肺癌细胞增殖的分子机制之一。(3)益气养阴散结方药物血清能降低肺癌细胞Survivin基因的表达水平,这可能是其发挥诱导肺癌细胞凋亡的分子机制之一。
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