乳腺干细胞是成体干细胞的一种,其具有自我更新和分化为其他细胞系的能力,国内关于乳腺干细胞的研究较少。本实验分三部分:1)乳腺干细胞体外分离、培养及鉴定;2)免疫印迹法检测乳腺干细胞、乳腺癌细胞系MCF-7和乳腺癌及癌旁正常组织中C-erbB-2和Maspin表达;3)免疫组化法检测乳腺癌和癌旁组织标本中C-erbB-2和Maspin表达。第一部分实验从乳腺癌旁正常组织中提取乳腺细胞进行原代培养,并应用免疫磁珠技术进行分离,通过免疫组化的方法对分离的具有干细胞特性的乳腺上皮细胞进行鉴定,继续培养并观察其分化增殖能力。实验成功从乳腺癌癌旁正常组织中提取细胞进行原代培养,并利用免疫磁珠方法分离出一种具有干细胞特性的MUC-/ESA+乳腺上皮细胞。找到了一种经济简便的实验室分离培养乳腺干细胞的方法。第二部分实验从乳腺干细胞、乳腺癌细胞系MCF-7细胞、乳腺癌和乳腺癌癌旁正常组织中提取蛋白,利用免疫印迹法检测其中的C-erbB-2和Maspin蛋白的表达情况。证实了乳腺干细胞及乳腺癌癌旁正常组织中不表达C-erbB-2蛋白,而高表达Maspin蛋白。乳腺干细胞是一种稳定的正常生长的乳腺导管上皮细胞,无恶变倾向,是组织工程中可用于组织器官再造的种子细胞。第三部分实验利用免疫组化法检测30例乳腺癌标本及其对应癌旁组织标本中C-erbB-2和Maspin蛋白的表达情况,并进行对比分析。证实了乳腺癌组织中既表达C-erbB-2蛋白又表达Maspin蛋白。C-erbB-2和Maspin基因在乳腺癌的发生发展中起着重要作用。