Al(OH)3和CpG ODN免疫佐剂对丙型肝炎病毒多表位抗原PCX3疫苗免疫效果影响的研究

来源 :复旦大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:zuhai
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
丙型肝炎病毒(HCV)为单股正链RNA病毒,其基因组编码约3010~3033aa的蛋白前体,从N-端起依次为核心蛋白(C)、包膜蛋白(E)、非结构蛋白NS1-NS5B。HCV具有高度的变异性,能够迅速突变逃逸宿主的免疫系统。因此,给疫苗的研究带来许多的困难。近年来的研究提示理想的HCV疫苗必须能够诱发高水平、广谱而特异的体液免疫应答和细胞免疫应答。针对HCV的高度变异性及免疫特点,在HCV基因产物中优选了5个具有良好免疫原性的高度保守B/T细胞表位,组合成一个多表位抗原基因pcx,这些表位分别来自核心蛋白(1~16aa,132~141aa),E1(126~135aa),NS3(139~147aa)及NS5B(768~775aa),以及破伤风毒素的T细胞表位用以增强T细胞免疫。pcx基因经过串联重复之后,构建成多表位抗原基因pcx3,与6×His-tag融合后,在E.coli宿主中获得高效表达,并通过Ni2+-NTA-agarose纯化。以HCV蛋白疫苗PCX3为抗原,分别加入Al(OH)3佐剂,CpG ODN佐剂,以及两种佐剂联合作用的复合佐剂,对雄性六周龄BALB/c小鼠进行常规免疫。Al(OH)3和CpG ODN复合佐剂与PCX3抗原联合作用组与其他免疫组相比,在ELISA检测小鼠血清中特异性IgG和IgM抗体实验中,该组小鼠产生的特异性IgG(1×106)和IgM(1×105)抗体滴度最高,持续时间最长;在非放射性细胞毒活性检测试剂盒检测NK细胞的自然杀伤效应(CTL)实验中,该组小鼠诱发的CTL杀伤效应(40.91%),显著高于其他免疫组(P<0.05);流式细胞仪对小鼠淋巴细胞亚群进行分型分析发现,从第2周开始,该组小鼠体内CD4+/CD8+细胞比值(3.26)显著高于PCX3抗原单独作用组(P<0.05)。结果表明,Al(OH)3和CpG ODN复合佐剂,可以从体液免疫和细胞免疫两方面对HCV蛋白疫苗PCX3的免疫效果进行增强,并且具有协同效应。
其他文献
齿型构件混合堤,是长江南京以下深水航道一期工程太仓~南通段中采用的新型构件混合堤,其应用和研究均处于初期阶段,对于这种齿型构件混合堤翻坝波浪力相关的理论或经验公式还需
自从1957年意大利阿亚水电站运用塑性混凝土作为防渗墙体材料以来,至今在世界各地塑性混凝土防渗墙得到了非常广泛的应用。与刚性混凝土相比,塑性混凝土具有初始弹模低,极限
我国地域辽阔,地基条件复杂,软弱地基类别多,分布广。为了满足地基的强度、变形及抗震等要求,必须对天然土层进行人工处理。水泥粉喷桩作为一种地基加固新技术,具有许多的优点。随
降雨入渗补给是平原区地下水补给的主要来源,降雨入渗补给量计算是地下水资源评价的重要部分。研究降雨入渗补给量计算的理论和方法,对指导人们更科学合理地开发利用地下水资源
水文地质参数是地下水资源评价数值模型识别、检验和预报的重要参数。然而它受水文地质条件及开采的影响,在时空上有较强的变异性,因此研究它的空间变异性对提高地下水资源评