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目的: 食管鳞状细胞癌恶性度高、预后差，食管癌发生、发展根本的分子生物学机制尚不清楚。近年来WRAP53(也被称为TCAB1或WDR79)作为肿瘤抑制基因p53的反义基因引起人们的广泛注意。最初对于 WRAP53的研究集中于其转录本对于正义基因 p53转录本的正向调控机制，同时证明了WRAP53敲除抑制DNA损害时P53的诱导。最近的研究则集中于其所编码的蛋白质的功能。WRAP53蛋白质是活性端粒酶蛋白的新成员，对端粒酶全酶的组装、在Cajal小体的累积以及行使功能以确保端粒的延长都是必须的。WRAP53蛋白能通过增加染色体末端端粒的长度促进祖细胞和肿瘤细胞的增殖，促进多种癌细胞的生存。但WRAP53 mRNA和蛋白在食管癌肿瘤组织中的表达及功能状态尚未见报道，本研究的目的致力于阐明食管鳞状细胞癌肿瘤组织中WRAP53mRNA和蛋白的表达差异及其与食管鳞状细胞癌患者临床病理参数之间的关系，并对WRAP53表达下调对食管鳞状细胞癌细胞株的增殖和凋亡的影响做一初步研究。 方法: 1.运用免疫印迹法和实时定量 PCR技术分别检测食管鳞状细胞癌细胞系(EC109， EC9706，KYSE150和KYSE180)、45对食管鳞状细胞癌组织和癌周正常食管粘膜上皮组织中WRAP53蛋白及WRAP53 mRNA的表达。 2.用免疫组织化学染色法对115例食管癌患者的食管鳞状细胞癌组织和85例癌周正常食管粘膜上皮组织（前面45对组织包括在内）中的WRAP53蛋白的表达进行半定量测定，全面描述WRAP53在食管鳞状细胞癌组织和癌周正常食管粘膜上皮组织的表达特点，结合临床资料进行综合分析和统计学处理。 3.应用细胞转染技术将特异性siWRAP53作用于食管鳞状细胞癌细胞株EC109细胞使其WRAP53表达下调，MTT法用于检测 WRAP53表达下调对食管鳞状细胞癌细胞株 EC109增殖的影响，免疫印迹法检测 WRAP53表达下调对凋亡蛋白BAX的影响，流式细胞术检测食管鳞状细胞癌细胞株 EC109凋亡率的变化，证实 WRAP53表达下调对食管鳞状细胞癌细胞株EC109细胞生长及凋亡的作用，应用细胞周期非特异性抗癌药物顺铂处理EC109，检测WRAP53在RNA及蛋白水平的变化情况。 结果: 1、食管鳞状细胞癌细胞系(EC109，EC9706，KYSE150和KYSE180)均能检测到WRAP53蛋白和mRNA的表达，但WRAP53蛋白和mRNA的相对表达量有明显的不同，原始肿瘤外侵较深的KYSE150和KYSE180（T4）WRAP53的表达明显高于原始肿瘤外侵较浅的EC109和EC9706（T3）；WRAP53蛋白和mRNA在食管鳞状细胞癌肿瘤组织中的表达较癌周正常粘膜上皮组织中的表达明显升高(P＜0.001)。 2、免疫组织化学检测显示食管鳞状细胞癌组织WRAP53蛋白的阳性表达率明显高于癌周正常粘膜上皮组织(P<0.001)；食管鳞状细胞癌组织及癌周正常粘膜上皮组织中WRAP53主要定位于细胞核上,显示黄色或者棕黄色染色，食管鳞状细胞癌组织阳性表达明显高于癌周正常组织（包括癌周粘膜上皮组织、间质组织、神经组织、平滑肌组织等）；低分化的食管鳞状细胞癌组织表现为强阳性表达，可见核分裂象上染色；高分化的食管鳞状细胞癌组织中，癌巢中间的角化珠特别是充分角化的肿瘤细胞呈阴性表达；癌巢周边幼稚的肿瘤细胞呈阳性表达，癌巢中央成熟的肿瘤细胞则表达逐渐降低。癌周食管正常粘膜上皮组织阴性或弱阳性表达，突出显示为基底细胞和基底细胞层上方细胞核染色,上皮内乳头状增生组织细胞阳性表达，鳞状上皮中层和表层呈阴性表达；WRAP53蛋白表达与食管鳞状细胞癌原发肿瘤浸润程度,TNM临床分期显著正相关(P=0.001、P=0.007)，与区域淋巴结转移正相关(P=0.026)，与年龄、性别、病理分化程度无明显相关性（P＞0.05）。 3、WRAP53表达下调能抑制食管鳞状细胞癌细胞株EC109细胞的增殖，同时WRAP53表达下调能增加EC109细胞BAX蛋白的表达和EC109细胞的凋亡率，细胞周期非特异性抗癌药物顺铂能在RNA和蛋白水平降低WRAP53的表达。 结论: 1.系统地证明了食管肿瘤组织及相应正常组织中WRAP53蛋白和WRAP53mRNA的表达差异，WRAP53蛋白和WRAP53mRNA在食管鳞状细胞癌组织中的表达较癌周正常粘膜上皮组织中的表达上调。 2.免疫组织化学检测结果揭示了食管鳞状细胞癌组织 WRAP53蛋白分布的特点：集中于细胞核，可能在基因水平上发挥生物学作用；与肿瘤细胞的分化程度有关，低分化高表达的特征明显，癌周食管正常粘膜上皮组织突出显示为基底细胞和基底细胞层上方细胞核染色，在分化成熟癌巢中央和角化珠中的鳞癌细胞以及鳞状上皮中层及表层细胞很低甚至呈阴性表达，提示了WRAP53与细胞增殖的相关性；WRAP53蛋白表达与食管癌原发肿瘤浸润程度、临床分期显著正相关(P=0.001、P=0.007)，与区域淋巴结转移正相关(P=0.026)，与年龄、性别、病理分化程度无明显相关（P>0.05）。KYSE150和KYSE180的WRAP53的表达明显高于EC109和EC9706，进一步确定WRAP53表达与食管癌原始肿瘤浸润程度的相关性，WRAP53的表达升高可以作为判断食管鳞状细胞癌侵蚀、转移的指标。 3. WRAP53表达下调促进食管鳞状细胞癌细胞株EC109细胞的凋亡，促使凋亡蛋白BAX的表达升高，进一步提示WRAP53表达的在食管鳞状细胞癌的发生发展过程中可能发挥的作用。抗癌药物顺铂能使WRAP53 mRNA和蛋白得表达下调，WRAP53有望成为一个食管鳞状细胞癌治疗新靶点。 4．我们的实验没能证明WRAP53与P53之间的相关性。