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谷胱甘肽是一种具有γ-谷氨酰基和巯基生物活性的三肽化合物,分为还原型谷胱甘肽(GSH)和氧化型谷胱甘肽(GSSG)。GSH在生物化学、医学、生物学和化学的研究测定中作为试剂得到广泛应用,而且在医药、食品、饲料及其他行业具有重要用途。本研究以YEPD加抗生素为初筛培养基,从土壤中分离筛选产GSH的酵母菌,经初筛和复筛得到GSH产量较高的27株酵母菌(G1-G27),其中在云南省海拔3.2km处筛选到的一株酵母G4菌株产GSH能力最高,产量达119mg/L。以野生型菌株G4为出发菌株,对其进行紫外线、亚硝基胍、甲基磺酸乙酯、硫酸二乙酯单因素诱变、双因素诱变和三重因素诱变,诱变剂对G4菌株致死率大小顺序为亚硝基胍>硫酸二乙酯>甲基磺酸乙酯>紫外线。经过单因素、双因素、三因素诱变和乙硫氨酸、精氨酸、甲硫氨酸、叠氮化钠的耐性筛选,最后筛选得到一株产GSH最高的突变菌株G-112-28,产量达到332.2mg/L,比出发菌株119mg/L提高了约179%。突变菌株G-112-28的遗传稳定性试验结果表明,该菌株产GSH性能稳定。对突变菌株G-112-28的营养条件优化的研究,分别研究不同的碳源、氮源、无机盐和前体等对GSH产量的影响。结果表明：碳源以蔗糖为最佳；氮源以蛋白胨最佳；无机盐K2HPO4、KH2PO4、MgSO4、 ZnCl2在低浓度时对GSH合成均有一定的促进作用,同时研究了前体对产量的影响。选择对G-112-28突变菌株的生长和产GSH影响较大的蔗糖、蛋白胨、无机盐K2HPO4、KH2PO4、MgSO4这四个因素进行正交分析,最终确定了一套发酵培养基配方(g/gL)：蔗糖20,蛋白胨50,K2HPO41.2,KH2PO41.8,MgSO43,ZnCl23,半胱氨酸6mmol,半胱氨酸盐酸盐2.5。对发酵温度、通气量、剪切力、种龄和接种量等GSH培养条件进行研究,在装量为40/250ml,初始培养基pH为7.0,接种量为10%时,种子培养温度为30℃、培养22h,发酵温度为30℃培养48h,GSH发酵产量最高。经发酵优化,G-112-28突变菌株产GSH达到402.3mg/L,比未优化前332.2mg/L提高了21.1%,比出发菌株G4119mg/L提高了238%。