动脉粥样硬化兔肝脏组织Se含量的检测与医学意义研究

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动脉粥样硬化是心血管疾病的病理基础,流行病学调查和临床检查发现与机体微量元素含量变化有关。微量元素是指在机体中含量极少的元素,但其具有许多重要的生理功能以及影响发病机制。微量元素的含量测定、分布情况、作用机制、以及对生物体的生理功能等多方面的研究,已经逐步引起化学、生物学及医药卫生研究领域的高度重视。微量元素的检测不仅可以为优化治疗方案提供准确、科学的依据,而且还为提前预防某些疾病特别是代谢性疾病和免疫系统疾病提供建设性意见。研究结果表明,硒缺乏与肝脏疾病的发生发展具有循证学上相关性。肝脏细胞的谷胱甘肽过氧化物(GSH-Px)活性会由于缺硒而降低,直接导致肝脏代谢功能紊乱,对过氧化物的清除能力将会不断下降,引发肝细胞膜功能破坏和脂质过氧化损害,进一步发展为肝细胞退行性变和坏死、肝功能减退恶化,肝脏纤维化等病变,使原有的肝脏疾病病情不断加重,甚至会直接导致死亡。肝脏代谢和解毒功能的减退可发展为凝血功能障碍或诱发肝性脑病。本论文以新西兰兔为研究对象,用高脂饮食复制兔动脉粥样硬化模型,获取肝脏,用硝酸、过氧化氢混合液微波消解样品,采用原子荧光光谱法测定肝脏组织中Se的含量,结合对照组探讨实验性动脉粥样硬化兔肝脏组织中Se含量的变化。同时结合正常组和高脂组饲料Se含量进行对比分析,探讨饮食结构对肝脏组织Se的含量影响。同时复制兔动脉粥样硬化治疗组模型,获取肝脏,用硝酸、过氧化氢混合液微波消解样品,采用原子荧光光谱法测定肝脏组织中Se的含量。分析经过药物治疗后,Se的含量变化,为进一步了解其病理基础提供依据,为进一步预防和治疗AS(动脉粥样硬化)提供思路。同时分析Se含量变化与肝脏疾病发生的关联性。论文主要内容如下:1.正常组肝脏组织Se含量测定按照AFS-230型双通道原子荧光光度计工作参数测定待测样品荧光强度(If)。以硒标准溶液的浓度(μg·L-1)为横坐标,荧光强度(If)为纵坐标利用线性拟合方式绘制标准曲线。对样品空白分别测定11次,以3倍标准偏差除以工作曲线的斜率求得方法的检出限。同时利用饲料样品按照仪器工作条件作精密度、重复性和加标回收实验,验证方法准确性和可靠性。同时测定饲料样品Se的含量。用正常饮食复制正常组兔模型,采集肝脏组织样品于干净塑料管中,对肝脏样品分别用蒸馏水、高纯水洗涤两次进行前处理。然后放置于电热鼓风干燥箱干燥12h。电子天平准确称取0.5000g肝脏组织样品,放置于聚四氟乙烯微波消解罐的内罐后加入硝酸、过氧化氢(3:1)混合液8mL微波消解样品,采用原子荧光光谱法测定肝脏组织中Se的含量。2.AS组兔肝脏组织的Se测定。用高脂饮食复制兔动脉粥样硬化模型,获取肝脏,用硝酸、过氧化氢混合液微波消解样品,按照原子荧光光度计测定条件采用原子荧光光谱法测定肝脏组织中Se的含量。结合正常组肝脏组织中Se的含量和饲料Se的含量,采用统计方法重点分析饮食结构对微量元素Se的影响,为预防AS的发生和发展提供思路。同时分析微量元素Se的变化对AS的发生和发展的影响。3.治疗组兔肝脏组织的Se测定。用高脂饮食复制兔动脉粥样硬化模型,然后给予药物(全反式维甲酸、瑞舒伐他汀、ML一7、褪黑素、替米沙坦)治疗,获取肝脏,用硝酸、过氧化氢混合液微波消解样品,采用原子荧光光谱法测定肝脏组织中Se的含量。统计分析治疗组和AS组微量元素Se的变化,探讨药物对肝脏组织Se含量的影响,为优化治疗方案提供指导意见。
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