菜籽植物甾醇的提取、纯化及抗氧化活性研究

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植物甾醇是一种类似于环状醇结构的物质,广泛分布于自然界,代表了植物代谢的一个终产物。天然植物甾醇种类繁多,主要包括β-谷甾醇、豆甾醇、菜籽甾醇和菜油甾醇4种无甲基甾醇,另外还有燕麦甾醇、菠菜甾醇、麦角甾醇等。近年来随着科学研究特别是生命科学、油脂科学与工程技术的迅猛发展,植物甾醇在医药、食品、化工、饲料、植物基因工程等领域被高度重视与关注。目前,提取植物甾醇的原料土要为植物油脱臭馏出物。本课题从多种菜籽油原料中提取菜籽植物甾醇,首先对植物甾醇提取工艺进行了研究,接着对粗甾醇进行纯化,其次对植物甾醇结构进行分析鉴定,最后通过对植物油和动物油的抗氧化实验,以及通过化学发光法来评价植物甾醇的抗氧化效果。主要研究结果如下:1.通过对菜籽毛油、菜籽油脚及菜籽脱臭馏出物中主要成分分析,得到菜籽毛油的水分0.1%;,脂肪酸96.7%;酸价2.94mgKOH儋;不皂化物0.8%。菜籽油脚的水分32.5%;酸价87.23 mgKOH/g:不皂化物1.8%;脂肪酸59.5%;磷脂0.15%。菜籽脱臭馏出物的水分0.9%;酸价97.1 mgKOH/g:不皂化物26.1%:脂肪酸55.4%;菜籽植物甾醇12.5%。实验选择了菜籽脱臭馏出物为主要的提取原料并进行了提取工艺的优化,实验结果表明:料液比w/v为1:1.6,酯化时间为7.1h,酯化温度为60.5℃,搅拌速度为420 r/min,催化剂量为1.52mL,甾醇得率可达7.768mg/g。将实验提取的粗甾醇用无水乙醇、正已烷和丙酮三种有机溶剂进行重结晶精制,实验结果表明:无水乙醇精制效果最好,得率可达65.4%,纯度可达93%。2.通过化学试剂特征显色法、紫外扫描、红外扫描、电镜扫描对菜籽甾醇进行了结构鉴定和表征。提取的植物甾醇中主要含有:β-谷甾醇、菜籽甾醇和菜油甾醇。3.植物甾醇对植物油和动物油的抗氧化实验,采用了不同浓度的植物甾醇和不同增效剂对其进行抗氧化研究。实验结果表明:植物甾醇对葵花籽油、菜籽油、大豆油及猪油都有一定得抗氧化效果,且抗氧化效果随着剂量的增大而增强。通过不同增效剂的比较,得出其在植物油和动物油中的抗氧化能力为甾醇<维生素C<维生素E<EDTA。4.通过化学发光法进行植物甾醇抗氧化实验研究,实验表明:通过四个发光体系的发光图谱分析得出,菜籽植物甾醇可以清除羟基自由基、超氧阴离子及双氧水,对DNA损伤的保护作用,表现出了一定的抗氧化能力。
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