【摘 要】
：
猪德尔塔冠状病毒（PDCoV）和猪肠道α冠状病毒（PEAV）是两种新发现的猪传染性冠状病毒,临床上均以腹泻为主,伴有呕吐等症状,临床症状相似,各年龄段猪均可感染,幼龄仔猪死亡率高达100%,给养猪业造成巨大的经济损失。本研究旨在建立一种快速、准确区分PDCoV和PEAV的二重RT-PCR方法;对广西壮族自治区部分地区猪腹泻样品进行PDCoV和PEAV检测,探究两种病毒遗传变异及流行现状;针对PDC
论文部分内容阅读
猪德尔塔冠状病毒（PDCoV）和猪肠道α冠状病毒（PEAV）是两种新发现的猪传染性冠状病毒,临床上均以腹泻为主,伴有呕吐等症状,临床症状相似,各年龄段猪均可感染,幼龄仔猪死亡率高达100%,给养猪业造成巨大的经济损失。本研究旨在建立一种快速、准确区分PDCoV和PEAV的二重RT-PCR方法;对广西壮族自治区部分地区猪腹泻样品进行PDCoV和PEAV检测,探究两种病毒遗传变异及流行现状;针对PDCoV和PEAV的N蛋白抑制I型IFN产生的机制进行研究。根据PDCoV和PEAV N基因序列,分别设计特异性引物,以阳性质粒为模板,对二重RT-PCR反应条件优化后进行特异性、敏感性试验;对2017-2018年,采集自广西壮族自治区62份肠道和腹泻样品进行检测,阳性样本进行RT-PCR分段扩增,拼接获得PDCoV全基因组全长。以PDCoV和PEAV基因组为模板,构建N基因真核表达质粒,转染HEK-293T细胞,通过q PCR证实PDCoV和PEAV N蛋白抑制IFN-β的产生,并通过Western blot、Co-IP等实验方法验证具体作用机制。建立的PDCoV和PEAV二重RT-PCR检测方法扩增出PDCoV和PEAV的特异性片段大小分别为690bp和208bp,且对PEDV、TGEV、PRV和PCV2无扩增条带;对PDCoV和PEAV的最低检测率分别为5.13×10~2copies/μL、4.73×10~1copies/μL。62份样品中PDCoV阳性率为19.4%（12/62）,PEDV、TGEV和Po RV阳性率分别为32.3%（20/62）、4.8%（3/62）、6.5%（4/62）,未检测到PEAV。5株全基因组序列分析显示在非结构蛋白Nsp2、Nsp3分别存在6碱基和9碱基缺失,并且CHN-GX81-2018毒株在S基因和3’-UTR没有基因缺失和插入现象。遗传进化分析表明其中4株与CHN-AH-2004的核苷酸同源性为98.2%-98.4%,属于中国谱系。CHN-GX81-2018毒株与Vietnam/Binh21/2015的核苷酸同源性为98.7%,属于越南/老挝/泰国谱系。PDCoV和PEAV的N蛋白均能抑制Poly I:C刺激的IFN-β的产生。进一步研究发现PDCoV和PEAV N蛋白通过与RIG-I相互作用,抑制RIG-I的泛素化修饰,同时抑制下游信号通路中的IRF3和p65（NF-κB亚基）的磷酸化,从而抑制IFN-β的产生。
其他文献
车标作为车辆生产厂家的标志信息,不易被更换且能够作为车辆身份的一种显著特征,在智能交通监管系统中有着极为重要的作用。并且,车标的检测和识别能更好地协助车辆管控和破案。目前,大量车标检测和识别方法被提出,这些方法已经应用在一些交通场景中。但是,由于车标的种类多样,检测和识别的场景较为复杂,使得这些方法在复杂场景下的鲁棒性和准确率不够高。本文提出一种基于类别一致性的车标识别深度学习算法,能够在多类别、
阿尔茨海默病（AD）是一种病因未明的神经退行性疾病。在我国,阿尔茨海默病患者超1000万例,每年产生费用超1万亿元,且走失老人事件中七成因AD而起。该病是一种严重的社会公共卫生问题,给社会和患者的家庭带来了不可估量的经济和精神负担。该病尚无法治愈且呈现出不可逆转的趋势,但是目前研究表明疾病的早期干预可有效改善患者的认知功能,降低患者及家属负担,经济效益显著。然而,对于阿尔茨海默病致病机理不明且发病
近年来,我国考研报考人数整体上成上升趋势,据教育部统计,2020年的报名人数达到341万,比2019年增加了50多万。随着考研人数的增加,高校扩大了研究生的招生比例,跨学科硕士研究生所占比例也越来越大,在教育学科中这种现象更是成为常态,教育学跨学科硕士研究生专业身份认同的问题也随之而来。跨学科个体的专业身份是否被自我和他人认同,不只关系到教育学跨学科研究生的培养质量,也影响着跨学科研究生的发展前景
肾脏是人体内生成尿液的重要脏器,肾脏的正常发育是保证机体稳态的根本。而肾发育从胚胎期E10.5d开始,输尿管芽（Ureteric bud,UB）接收信号不断分枝,最终形成集合管和输尿管。同时帽状间质（Cap mesenchyme,CM）不断分化,在E14.5d,肾小球开始发育,而后在E18.5d形成功能完全的肾单位。成纤维细胞生长因子10（Fibroblast growth factor 10,F
生态产品具有经济价值是学术界的统一认识，近年来中国在林木价值、生态系统服务价值、绿色农产品价值以及生态优势转化为产业优势等方面进行了生态产品价值实现的积极探索。但目前缺乏清晰的生态产品产权和生态产品价值核算体系，缺乏合理的生态产品损害赔偿和保护补偿机制等多方面问题，制约着生态产品价值实现机制的完善。应通过完善自然资源生态产品产权制度、财政投入及生态补偿机制、市场体系和价格机制，建立生产产品核算机制
位置服务（LBS）己被广泛地应用于工业的各个领域,成为人们日常生活的重要组成部分。然而,LBS在给人们带来便利的同时,其服务器端正变得越来越不可信,引发了严重用户位置隐私安全问题。本文提出通过构造“掩盖范围”以保护用户位置服务请求涉及的真实査询范围,从而保护用户位置隐私安全。本论文首先给岀了基于客户端的LBS位置隐私保护框架。其基本思想是:基于客户端,通过为用户提交的位置服务请求构造生成一个新请求
通过借鉴国内外学者对普惠金融指标体系的构建方法，本文构建了一套适合我国且能够反映农商银行“支农支小”特性的普惠金融发展水平的测度指标，并选择六家上市或拟上市的农商银行作为对比测度对象。通过计算和解析测度结果可知，立足于农村和中小城市的县域农商银行具有发展普惠金融的天然优势，一线城市或大城市的城区农商银行在规模、产品创新和数字化转型上有优势，但必须发挥科技优势加大“支农支小”力度才能为实现乡村振兴战
回顾国家暂停撤点并校以来的政策趋向,随着城镇化进程加快与乡村结构的变化,乡村小规模学校的命运并不是消失,而是呈现出在可预见范围内增多的趋势,并在此基础上寻求“小而美、小而优”的发展。但是,由于部分教育决策者、乡村学校治理者及其他利益相关者对小规模学校存在的价值和功能认识不足,当前乡村小规模学校的发展状况并不乐观,影响了乡村小规模学校质量的提升。因此,通过研究不同时期学校功能的变迁,梳理出乡村小规模
状态估计在实时优化、过程监视和控制中发挥着重要的作用。虽然扩展卡尔曼滤波可以通过协调测量数据来拟合由状态空间模型所描述的非线性动态过程并从噪声测量中估计出期望的状态,但其在进行状态估计时需要已知非线性动态系统的数学模型并要求测量噪声服从高斯分布。然而对于一些复杂或未知的动态系统,机理模型的获取往往十分困难甚至不可实现;更重要的是,设备在采集和传输数据的过程中不仅会引入固有的高斯随机噪声还经常会受到
莲藕是我国种植面积最广的水生蔬菜,不仅营养丰富而且具有较高的食药用价值。莲藕在贮藏过程中易发生褐变,造成巨大损失,将其加工成藕粉、饮料、脆片等产品,不仅拓宽开发利用空间,也可以延长相关产业链。但是我国莲藕品种繁多,不同品种间品质也存在较大差异,而适宜的原料是生产优质加工产品的基础。因此,本研究收集28个广泛种植的栽培品种和地方品种测定其采后品质,并提取淀粉研究其特性,进而筛选出适合加工藕粉的品种;