牙鲆是一种营养价值和经济价值很高的硬骨鱼类。近年来由于养殖规模的扩大、环境的不断恶化和抗病力下降等因素,导致牙鲆病害频发,给养殖业造成了巨大的经济损失。迟钝爱德华式菌（Edwardsiella tarda）,又称杀鱼爱德华氏菌（Edwardsiella pisicicida）,是引发牙鲆疾病一种常见的重要致病菌。在脊椎动物的基因组中,主要组织相容性复合体（The major histocompatibility complex,MHC）是一类高度多态的基因群,在高等脊椎动物的抗病原免疫反应中具有重要的作用,但是在低等脊椎动物如鱼类中,MHC I的作用并不很清晰。组蛋白（Histone）是一类结构上对染色体DNA的包装起重要作用的蛋白,虽然在哺乳动物中表明组蛋白参与基因的表达调节和宿主对病原体的免疫反应,但在鱼类组蛋白免疫功能研究还基本未有研究报道。本文以牙鲆为研究材料,围绕牙鲆MHC Ⅰα（PoMHC Ⅰα）和组蛋白H3.3（Po H3.3）抗感染免疫机制开展以下研究:1.PoMHC Ⅰα抗感染免疫研究（1）通过RT-PCR获得了PoMHC Ⅰα的c DNA序列,其包含1011 bp的开放性阅读框。通过SMART在线分析发现,PoMHC Ⅰα包含其他物种MHC Ⅰα序列典型的结构特征:信号肽,MHC＿I结构域,IGc1结构域以及跨膜结构域。结果表明,PoMHC Ⅰα可能与其他脊椎动物MHCⅠα的生物学功能相似。（2）利用RT-q PCR检测PoMHC Ⅰα在牙鲆组织中的表达。结果显示,PoMHC Ⅰα在血液中的表达量最高,而且在脾脏、肾脏和肝脏等免疫组织中也高表达。在利用胞外菌、胞内菌以及病毒感染牙鲆后,发现PoMHC Ⅰαm RNAs在脾脏、肾脏和肝脏的表达具有时间变化。（3）体外原核表达并纯化了PoMHC Ⅰα重组蛋白（r PoMHC Ⅰα）。发现r PoMHC Ⅰα可以增强对胞内致病菌E.tarda的清除能力,同时促进免疫相关因子IL-10、TNFα、TCRα和CD8α的表达。（4）流式细胞术实验,证实了r PoMHC Ⅰα具有抗原呈递功能,并且具有激活牙鲆白细胞（PBLs）增殖的功能。（5）通过构建PoMHC Ⅰα过表达质粒,实现了PoMHC Ⅰα在牙鲆组织中的过表达。感染实验表明,PoMHC Ⅰα的过表达显著增强了牙鲆对致病菌E.tarda抵抗力。2.Po H3.3抗感染免疫（1）通过牙鲆四种组蛋白与其他鱼类或哺乳动物已知组蛋白序列的多重序列比对显示,H1具有中等的整体序列同源性（38.46-49.30%）,而H2AX、H3和H3.3具有较高的整体序列同源性（超过80%）,结果表明,牙鲆组蛋白可能与其他脊椎动物组蛋白的生物学功能相似。（2）利用RT-q PCR检测四种组蛋白（H1、H2AX、H3和H3.3）在牙鲆组织中的表达。结果显示,四个组蛋白在血液中的表达量最高,而且在脾脏、肾脏和肝脏等免疫组织中也高表达。在利用胞外菌、胞内菌以及病毒感染牙鲆后,发现四种组蛋白m RNAs在脾脏、肾脏和肝脏的表达具有时间依赖性变化。（3）体外原核表达并纯化了Po H3.3重组蛋白（r Po H3.3）。细菌结合实验表明,r Po H3.3对革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌具有广泛的结合能力,且结合后可以显著抑制细菌的生长。（4）通过构建Po H3.3过表达质粒,实现了Po H3.3在牙鲆组织中的过表达。感染实验表明,Po H3.3的显著增强了牙鲆对致病菌E.tarda抵抗力。本课题揭示了牙鲆MHC Ⅰα和Histones在抗病原微生物感染免疫反应中发挥重要作用。本研究为牙鲆的免疫学以及硬骨鱼类的免疫功能提供新的见解。