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目的: 本研究旨在观察1,25-二羟维生素D3(VitD3)对小鼠角膜移植术后早期排斥反应的影响,拟对参与免疫排斥反应的Th17细胞及相关细胞因子在同种异体角膜移植术后的效应进行研究。 方法: 以C57BL/6小鼠作为受体,BALB/c小鼠作为供体,建立小鼠穿透性角膜移植术(PKP)模型。术后将手术成功的C57BL/6小鼠完全随机分为角膜移植组、VitD3干预组,随机抽取同等数量的正常健康C57BL/6小鼠作为正常对照组。对VitD3干预组小鼠隔日腹腔注射1,25-二羟维生素D31.0μg/kg,正常对照组和角膜移植组小鼠隔日腹腔注射同等剂量的大豆油,连续2周。术后每天在裂隙灯活组织镜下观察角膜植片的透明情况,评估排斥反应发生的程度。术后2周,取角膜植片做病理学检测,观察各组角膜植片及炎症细胞浸润的情况;应用实时荧光定量PCR检测脾脏中淋巴细胞细胞因子IL-17、ROR-γt和IFN-γmRNA的表达水平;Western blot分析外周血中Th17细胞特征性转录因子ROR-γt及特征性细胞因子IL-17的蛋白表达量;流式细胞仪检测外周血淋巴细胞细胞因子IL-17和IFN-γ的表达情况。 结果: 1,25-二羟维生素D3显著地下调了同种异体角膜移植术后排斥反应。应用1,25-二羟维生素D3干预后,小鼠角膜植片病理反应减轻;角膜移植组中脾脏淋巴细胞细胞因子IL-17、ROR-γt和IFN-γmRNA的表达水平和外周血中转录因子ROR-γt及细胞因子IL-17的蛋白表达量均高于VitD3干预组和正常对照组,VitD3干预组略高于正常对照组(P=0.000);流式细胞仪检测外周血淋巴细胞细胞因子IL-17和IFN-γ的结果显示,VitD3干预组中细胞因子IFN-γ的表达量高于正常对照组,但是低于角膜移植组(P=0.000);VitD3干预组中细胞因子IL-17的表达量低于角膜移植组(P=0.000),而与正常对照组之间的差异无明显统计学意义(P=0.083)。 结论: 1,25-二羟维生素D3对小鼠角膜移植早期排斥反应有下调作用,发现这与Th17细胞细胞因子IL-17及转录因子ROR-γt的调节密切相关,1,25-二羟维生素D3通过下调Th17细胞细胞因子IL-17及转录因子ROR-γt来减轻角膜移植术后免疫排斥反应。