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1.抗肝癌重组单链Fv段-免疫毒素(m/hseFv25-TNFα)的表达、纯化及导向研究 将抗肝癌重组单链Fv段-免疫毒素(pGEX 4T-1 m/hscFv25-TNFα)在大肠杆菌JM109中以IPTG诱导进行表达。表达产物为包涵体形式,溶解和折叠后,以GST亲合层析色谱纯化。间接免疫荧光染色表明m/hscFv25-TNFα的特异性和亲和力与亲本抗体HAb25相比没有明显下降。MTT实验提示在放线菌素D存在的情况下,体外m/hscFv25-TNFα对靶细胞SMMC-7721有明显的细胞毒作用;如无放线菌素D,靶细胞SMMC-7721则对m/hscFv25-TNFα不敏感。荷肝癌裸鼠体内的抑瘤实验显示m/hscFv25-TNFα对荷肝癌裸鼠体内直径2~4mm左右的肿瘤具有一定的导向杀伤作用,实验组14只裸鼠中3只部分缓解,4只完全消失,5只处于静止状态。而TNFα对照组无完全缓解。我们的结果提示TNFα对靶细胞SMMC-7721的杀伤作用不是直接的,必须依赖于体内的某些机制,可能TNFα是通过作用于血管肉皮细胞,或通过诱导肿瘤细胞凋亡,或体内某些物质起到了放线菌素D、谷胱甘肽或转录抑制因子的作用,需进一步研究以明确之。