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目的:了解贵州省安顺、赤水、贵阳、惠水、凯里、六盘水及遵义城市家蝇对拟除虫菊酯类及有机磷类杀虫剂的抗药性现状,计算Vssc、Ace基因在各种群中的突变频率,为贵州省的家蝇防制提供科学依据。方法:使用挥网捕蝇法到上述地区采集家蝇带回实验室常规饲养,点滴法进行家蝇抗药性生物测定并计算对应杀虫剂的半数致死剂量,特异性等位基因PCR方法扩增Vssc基因并根据琼脂糖凝胶电泳结果判断基因型,PCR方法扩增Ace基因测序比对后检测基因型,并分析突变基因频率与抗药性之间的关系,Arlequin 3.5软件进行遗传结构分析。结果:家蝇对高效氯氰菊酯、氯菊酯、溴氰菊酯、敌敌畏及双硫磷的半数致死剂量分别是0.084~0.24885,0.0973~0.3703,0.04935~0.15085,0.56865~1.21415及13.8005~41.12605μg/只;抗性系数分别是27.36~81.06,7.48~28.48,78.33~239.44,142.16~303.54及122.13~363.95;在7个种群中检测出5种Vssc基因型,突变频率在0~15%,与拟除虫菊酯类杀虫剂抗药性相关决定系数小于0.4818,哈迪温伯格平衡检验显示Vssc 1014位点观测杂合度与期望杂合度P值大于0.05,惠水种群在该位点与其他种群之间的群体间分化系数在0.05177~0.13131(P<0.05),其他种群间的分化系数在0.05247~0.09428(P<0.05);各种群Ace基因均在260、342、407位点发生突变,检测出8种基因型,11种联合突变组合,V/L+A+Y组合与敌敌畏抗药性相关决定系数为0.9411,260L突变频率在27.4~73.8%,342A在59.1~76.7%,342V在23.7~40.9%,407Y在83.4~100.0%,哈迪温伯格平衡检验显示凯里、遵义种群在260位点,贵阳、凯里在342位点,赤水、贵阳、惠水,凯里及六盘水种群在407位点的观测杂合度与期望杂合度P值大于0.05,各种群260与342位点突变的连锁不平衡检验P值小于0.05,各种群间Ace基因的群体间分化系数在0.03563~0.08246(P<0.05);各种群之间Vssc、Ace基因的遗传距离分别与地理距离的相关决定系数为0.03658、0.07403。结论:贵州省安顺、赤水、贵阳、惠水、凯里、六盘水及遵义的城市家蝇对拟除虫菊酯类及有机磷类杀虫剂产生了抗药性;各种群家蝇Ace基因在342及407位点突变频率很高;各种群家蝇之间的Vssc、Ace基因遗传分化不同,部分抗性位点频率偏离哈迪-温伯格平衡,Ace基因突变位点有连锁关系。