研究背景：　　炎症反应与心肌缺血/再灌注损伤（myocardialischemia/reperfusion,MI/R）密切相关，是再灌注损伤的重要机制之一。中性粒细胞（PMN）与血管内皮细胞（EC）的相互黏附和作用，进而引起PMN在病灶中浸润，是引起MI/R炎症反应的起始环节，也是MI/R损伤发生的前提条件。因此，在心肌再灌注时如果能够抑制PMN与EC黏附将能减轻中性粒细胞局部浸润引起的心脏损伤。　　近年发现，在临床重症患者中强化胰岛素治疗能够保护血管内皮细胞，从而显著降低患者的死亡率，但其机制尚不明确。我们及其他实验室均发现，胰岛素能抑制促炎因子的表达，如核因子-κB（NF-κB）、肿瘤坏死因子α（TNF-α）等，发挥抗炎作用。同时，大量证据已提示胰岛素能保护MI/R心脏，并且抗心肌细胞和冠状动脉内皮细胞凋亡可能是其作用机制之一。那么，胰岛素是否能够通过发挥抗中性粒细胞与血管内皮细胞黏附，减轻炎性损伤来保护MI/R受损心脏，仍未有相关报道。　　研究目的：　　检测胰岛素是否能够抑制心肌缺血/再灌注中性粒细胞与血管内皮细胞间的黏附，并进而抑制缺血/再灌注心脏的受损。　　实验方法：　　(1)PMN的分离和标记兔麻醉后，在进行MI/R之前，从颈动脉抽血20ml，抗凝处理，用6％右旋糖酐沉淀红细胞和中性粒细胞，吸取沉淀层表面的白膜层后再用低渗液裂解残留红细胞，而后加在淋巴细胞分离液表面进行密度分离，得到底层的中性粒细胞。调整细胞浓度，用荧光染色剂PKH26进行染色，血浆终止反应，清洗备用。　　(2)常规制备兔MI/R（45min/4h）模型，心肌缺血45min后松开套管使缺血心肌再灌注4h。缺血15min后开始药物治疗（2ml·kg-1·h-1），将兔随机分为以下4组：(1)假手术组（Sham）；(2)对照组（Vehicle）（0.9％NaCl）；(3)GIK组（葡萄糖250g/L、胰岛素60U/L及氯化钾80mmol/L）；(4)GK组（葡萄糖250g/L、氯化钾80mmol/L）。　　(3)MI/R过程中多道生理记录仪观测血流动力学的变化(MAP,HR,LVSP,LVEDP,±LVdp/dt)；采用特异性试剂盒多时间点检测血浆中CK的水平；再灌注4h后取心脏测定心肌梗死面积，利用Evansblue-TTC染色，采用数码照相－计算机面积测定法(软件：SigmaScan)；并利用特异性试剂盒检测髓过氧化物酶（MPO）的活性；免疫组化染色观察在再灌注20min心脏血管内皮细胞表面粘附分子P选择素（P-selectin）和24h细胞间黏附分子1（ICAM-1）的表达情况；　　(4)在再灌注4h后分离冠状动脉，与荧光标记的中性粒细胞共育20min，荧光显微镜下观察黏附到冠状动脉内皮表面的中性粒细胞数。　　实验结果：　　1．胰岛素减轻心脏缺血/再灌注损伤、改善心功能　　再灌注时给予GIK能减轻兔MI/R的损伤，与生理盐水组相比较，心脏的梗死面积出现明显减少(35.7±2.7％vs.对照组48.6±3.2％,P<0.01,n=10)，并能显著降低CK活性的升高水平，以及有效改善心脏功能，表现为GIK组+LVdP/dtmax和?LVdP/dtmax分别较生理盐水对照组增加50.0％(P<0.01)和59.5％(P<0.01)。而在去除GIK中的胰岛素后，GK未见显著的心脏功能改善和损伤减轻。由此表明，胰岛素在GIK心脏保护中起关键作用。　　2．胰岛素降低血管内皮黏附分子的表达、抑制PMN/EC黏附和PMN浸润　　与生理盐水组相比较，GIK处理明显降低冠脉内皮表面黏附分子P-selectin(10.9±2.7％vs.24.8±3.5％,P<0.01)和ICAM-1(32.4±2.2％vs.58.6±3.7％,P<0.01)的表达，抑制中性粒细胞与血管内皮细胞的黏附（108±8vs.156±10PMNs/mm2,P<0.01,n=5），进而减轻中性粒细胞在心肌组织中的聚集，表现为心脏的MPO活性显著降低（0.62±0.08vs.1.18±0.11U/100gtissue,P<0.01,n=10）。然而GK组与生理盐水组比较各项指标均没有显著性差异（均P>0.05）。表明胰岛素是GIK发挥I/R心肌抗炎保护作用的关键成分。　　结论：　　胰岛素可抑制I/R心脏血管内皮表面粘附分子P-selectin、ICAM-1的表达，减轻中性粒细胞与冠状动脉血管内皮细胞的粘附，进而降低中性粒细胞在心肌组织中的浸润和聚集。胰岛素的这种抗黏附作用可能是其保护MI/R心脏的机制之一。