EBNA1、EBNA2、SS56、ACA与干燥综合征的相关性研究

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背景干燥综合征(Sjogren syndrome, SS)是一种侵犯泪腺、唾液腺等外分泌腺体,以大量淋巴细胞浸润为特征的慢性自身免疫性疾病。大约一半的SS患者可伴有系统损害,其中最严重的可发展为淋巴瘤,常见的有B细胞淋巴瘤和非何杰金病(NHL)。目前SS的病因和发病机制尚不清楚,病因可能与遗传因素、环境因素如病毒感染、性激素等有关。一般认为病毒感染并非本病的直接致病因素,可能是本病的激发因素。国内外学者大多数的研究证实EBV与SS发病密切相关。大量证据也表明EBV与淋巴瘤的发生相关。EBNA1和EBNA2是EBV潜伏期表达的核心抗原。研究发现EBNA1/EBNA2抗体≤1与发生淋巴瘤的风险相关。本文旨在研究EBNA1和EBNA2蛋白与SS的关系。SS56是2001年发现的新型蛋白,其结构与52KDRo/SSA抗原相关,可能参与SS的发病。抗心磷脂抗体(ACA)是抗磷脂抗体的一种,在SS中的意义尚不明确,本文也同时研究SS56、ACA与SS的关系。目的1.探讨EBNA1和EBNA2蛋白在SS中的意义。2.探讨SS56抗体、ACA抗体在SS发病及诊断中的意义。方法1.收集2004年1月1日至2012年10月30日我院SS病例随访资料。收集相应SS患者的唇腺组织蜡块及血清,记录病例一般情况、临床特征、实验室相关检查等,分组标准为:按2002年SS欧美会议分类诊断标准分为pSS(原发性干燥综合征)组及sSS(继发性干燥综合征)组。2.采用免疫组织化Envision法测定32例pSS患者、7例sSS患者及4例正常唇腺组织中EBNA1和EBNA2的表达(以细胞胞浆、胞核中出现淡黄到棕黄色细颗粒状物质,着色高于背景底色为阳性)。测定积分光密度值并进行定量分析,利用统计学方法得出结论。3. ELISA法检测血清中EBNA1-IgG抗体及SS56抗体的表达。4.化学发光法检测血清中ACA抗体的表达结果1.EBNA1和EBNA2在唇腺组织中的表达:(1)EBNA1和EBNA2在SS患者唇腺组织中浸润的浆细胞,B淋巴细胞阳性表达,在唇腺导管上皮细胞(ductal epithelial cells,DEC)、和腺泡上皮细胞(acinar epithelial cells, AEC)中少量阳性表达,而正常对照组未见EBNA1和EBNA2的阳性表达。(2)SS唇腺组织中EBNA1的阳性率为71.8%(28/39),EBNA2的阳性率为69.2%(27/39),比较无差异(p>0.05),正常对照组中无EBNA1和EBNA2的表达。pSS中EBNA1和EBNA2的阳性率分别为68.8%(22/32)、65.6%(21/32),在sSS中EBNA1和EBNA2的阳性率都为71.4%(5/7)。EBNA1在pSS组和sSS组中的阳性率比较无差异(p>0.05),EBNA2在pSS组和sSS组中的阳性率比较无差异(p>0.05)。(3)39例SS中有27例共同表达EBNA1和EBNA2,1例只表达EBNAl。(4)积分光密度值EBNA1/EBNA2>1(17例)和EBNA1/EBNA2≤1(10例)患者的临床表现(口干、眼干、口腔溃疡、视力下降、发热、乏力、关节痛、腮腺炎、脾脏肿大)无差异。上述两组的年龄、病程及实验室检查(WBC、RBC、PLT、HB、 W-ESR、AP, GP、ALT, AST、IgG、IgA、C3、C4等)差异无统计学意义。2.血清中检测到EBNA1-IgG抗体在pSS组、sSS组及正常对照组中阳性率无差异(p>0.05)。3.血清中SS56抗体在pSS患者中的阳性率(84.4%)高于正常对照组(43.5%)(p<0.05)4.血清中ACA抗体在pSS组患者的阳性率为6.3%(2/32)与正常对照组4.5%(1/22)相比无明显差异(p>0.05)结论:1.SS患者唇腺组织中EBNA1的阳性率为71.8%,EBNA2的阳性率为69.2%,表达高于正常唇腺组织(p<0.05), EBV可能参与SS的发病。2.SS患者血清中EBNA1-IgG抗体与正常对照组阳性率无明显差异(p>0.05)。3.14例SS.患者血清中SS56抗体阳性率为85.7%,高于SSA(78.5%)、SSB(35.7%)及正常对照组,提示SS56抗体是SS的血清家族成员之一,可以作为SS诊断的血清学指标。4.pSS患者血清中ACA抗体与正常对照组阳性率无明显差异(p>0.05)
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