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目的：本文采用PCR-SSCP银染法对烟台地区71例肺结核患者痰标本临床分离株同时进行KatG基因、rpoB基因和rpsL基因突变分析，探讨烟台地区结核分枝杆菌耐药基因的检测与耐药水平的关系，监测耐药菌株的发展，有助于指导临床治疗和预防。方法：收集烟台地区北海医院、结核病防治所自2004年3月至2005年10月间收治确诊为肺结核的患者71例，H37Rv标准菌株购于中国药品生物制品检定所。采集患者痰液标本，痰标本经前处理后，经Bactec-460仪培养3～7d，部分培养菌做药敏梯度试验，部分培养菌提取DNA。H37Rv标准菌株和71株临床分离株以katG，rpsL和rpoB基因引物经PCR扩增，PCR扩增产物经SSCP分析，以结核分支杆菌标准株为对照，即可检测到基因突变。结果：①71例临床标本中，耐SM56株，耐药率78.9％；耐INH55株，耐药率77.4％；耐RFP58株，耐药率为81.6％。②71株结核分支杆菌临床分离株KatG，rpoB，和rpsL基因分别扩增出280bp，213bp和267bp条带，其扩增图谱与H37Rv标准菌株相同。③56株耐SM分离株中，40株rpsL基因单链DNA带泳动异常，总突变率为71.4％；其中41株高耐SM中，36株SSCP带谱与对照相比有不同程度的差异，突变率为87.8％；15株低耐SM中，4株SSCP出现泳动变位，突变率为26.7％。58株耐RFP分离株中，45株rpoB基因单链DNA带泳动异常，总突变率为77.6％；其中40株高耐RFP中，37株SSCP带谱与对照相比有不同程度的差异，突变率为92.5％；18株低耐RFP中，8株SSCP出现泳动变位，突变率为44.4％。55株耐INH分离株中，37株KatG基因单链DNA带泳动异常，总突变率为67.3％；其中47株高耐INH中，36株SSCP带谱与对照相比有不同程度的差异，突变率为78.7％；8株低耐INH中，1株SSCP出现泳动变位，突变率为12.5％。结论：本研究表明烟台地区流行的结核分支杆菌耐RFP，INH，SM耐药性的产生主要是由于rpoB，KatG和rpsL基因突变所致。3种耐药基因突变率略低于文献报道，可能是由于地区差异的原因。且耐药结核分支杆菌基因突变绝大多数发生在高浓度耐药株，少部分在低浓度耐药株发生突变。