目的:研究采用注射用吲哚菁绿荧光染料,通过体外可见光和近红外荧光融合图像示踪阴茎癌前哨淋巴结的基础理论和临床应用方法。方法:1、荧光染料浓度、体外放置时间与荧光强度相关性的研究:配制14个梯度浓度的吲哚菁绿溶液,分别在0min、10min、20min、30min、60min、2h、4h、6h、8h、12h、24h成像,记录不同时刻近红外荧光图像的灰度值及信噪比;2、760nm近红外光穿透深度的研究:制备含不同浓度吲哚菁绿的1.5%琼脂糖凝胶,进行荧光成像,测定穿透深度;3、吲哚菁绿体内代谢和体外活体成像的动物实验:SD大鼠尾静脉注射吲哚菁绿溶液(2.5mg/ml,4mg/kg),进行大鼠活体体外成像;4、示踪阴茎癌前哨淋巴结的临床研究:4例阴茎癌患者,年龄62~78岁,肿物直径为1~3.5cm,于肿瘤周围皮下注射2.5mg/ml,共1 ml的吲哚菁绿溶液,实时观察双侧腹股沟淋巴结的荧光影像,并在荧光引导下行淋巴结切除。结果:1、吲哚菁绿溶液的最佳近红外荧光成像浓度是13.11μmol/L,浓度太低或太高都会影响成像效果;2、溶液在室温下,随着体外放置时间的延长,低浓度的ICG溶液荧光信噪比和灰度值均下降,24小时基本消失;3、溶液浓度13.11μmol/L时,最大穿透深度为9.0mm;4、吲哚菁绿静脉注射后首先聚集于肝脏,后通过肝胆代谢,经消化道排泄;5、吲哚菁绿溶液注射在阴茎肿瘤周围皮下,注射剂量为1ml(2.5mg/ml),注射10分钟左右,体外近红外荧光能够准确定位前哨淋巴结,并能持续引导术中淋巴结的分离和切除。结论:吲哚菁绿溶液的体内外近红外荧光图像与溶液的浓度、体外放置的时间密切相关,溶液配制好后要立刻使用,最佳成像深度是9.0mm,皮下注射后迅速沿淋巴系统流动,进入血液后通过肝胆代谢排出体外,可见光和近红外荧光融合图像能够有效示踪阴茎癌前哨淋巴结。