第一章大鼠骨髓间充质干细胞的分离、纯化与鉴定　　 目的：建立体外分离、纯化并扩增大鼠骨髓间充质干细胞（bone marrow mesenchymal stemcells，BMSCs）的方法。对所培养的BMSCS进行表面标志鉴定并检测它们向脂肪细胞分化的潜能。方法：从大鼠股骨下端抽取骨髓，以贴壁培养法分离、纯化并扩增大鼠BMSCs；流式细胞仪（FCM）检测所培养的第二代细胞的细胞表面抗原；用成脂诱导剂对第二代细胞进行诱导分化，分别在第7天、第14天和第21天对诱导后细胞进行油红O染色，观察胞浆内脂滴出现情况。结果：所培养细胞为成纤维细胞样，原代细胞呈集落状生长；第二代细胞的细胞表面抗原CD29和CD90为阳性，造血细胞谱系标志CD45为阴性；在诱导后第7天、第14天和第21天，镜下可见分别约有7％、35％和65％的细胞内积聚了可被油红O染液着色的脂滴，证实这些细胞发生了成脂分化。结论：本研究成功地在体外分离、纯化和扩增了大鼠BMSCs；这些扩增后的第二代细胞表达BMSCs表面标志，具有良好的增殖及向脂肪细胞分化的潜能。　　 第二章具有微米级化学图案的生物材料聚乙二醇和聚磺酸基甜菜碱-异丁烯酸的生物相容性鉴定　　 目的：在生物材料表面构建微米级的化学图案，将BMSCs接种其上，观察BMSCs在生物材料表面的生长情况，进行生物相容性鉴定。方法：消化第二代BMSCs，以2.0×107/L的密度将细胞接种于具有微米级化学图案的聚乙二醇（polyethylene glycol，PEG）和聚磺酸琏甜菜碱-异丁烯酸（sulfobetaine methacrylate，SBMA）生物材料表面，继续培养一周左右时间，取出上述细胞进行吖啶橙（acridine orange，AO）染色，观察细胞生长情况。结果：接种有BMSCs的PEG材料膜和SBMA材料膜，经过吖啶橙染色后，可以看出BMSCs在两种材料表面均生长良好，而且有图案处生长明显高于无图案处。结论：具有微米级化学图案的PEG和SBMA有良好的生物相容性，为下一步在这两种生物材料表面进行BMSCs的定向分化研究打下了良好的基础。　　 第三章大鼠骨髓间充质干细胞在生物材料表面定向分化为脂肪细胞　　 目的：将BMSCs接种到具有微米级化学图案的生物材料表而，结合化学物质诱导，找到合适的分化条件，实现BMSCs在较短的时间内高效分化为脂肪细胞。方法：通过贴壁培养法体外分离纯化大鼠BMSCs，取第二代BMSCs接种剑普通玻片表而和具有微米级化学图案的生物材料PEG和SBMA表面，并使用成脂诱导剂进行诱导分化，对诱导分化的细胞分别在第5天、第10天和第15天进行油红O染色，脱察比较在不同材料表面的诱导分化效率。结果：BMSCs成脂诱导分化后，经油红O染色，可见诱导组细胞胞浆内出现大量红染脂滴，诱导分化效率随培养时间的延长明显增高；在PEG和SBMA两种生物材料表面的诱导分化效率没有明显差别，并凡在生物材料表面诱导比在普通玻片上诱导分化效率明显增高。结论：成脂诱导剂和生物材料微米级化学图案的共同作用能够加速BMSCs向脂肪细胞方向分化，并且诱导分化效率比单独使用诱导剂的情况明显提高。