论文部分内容阅读
海洋真菌是海洋生物的重要组成部分,其次级代谢产物丰富,生物活性多样,现已经成为新天然产物发现的重要源泉。研究表明,有很多海洋真菌与其他海洋生物形成共附生的关系,这种相互关系使海洋真菌产生了更加多样的次级代谢产物,甚至还有可能产生与宿主相同或相似的活性物质。因此,充分有效的发掘海洋共附生真菌的天然产物具有重要的研究价值和潜力。本论文采用三种分离培养基从10份海草、9份海绵、11份珊瑚和1份中华紫蛤样品中共分离得到149株真菌,通过形态排重选取了33株菌做ITS序列分析,进一步确定它们的分类地位,归属于3个门(子囊菌门、担子菌门和半知菌门),8个目和10个属。抗菌活性测试显示12株真菌的发酵产物对枯草芽孢杆菌和金黄色葡萄球菌具有较强的抗菌活性。采用HPLC对分离真菌的发酵产物进行化学分析,优选出一株代谢产物相对丰富的曲霉属真菌HNMF114进行大规模发酵。采用硅胶柱、反相ODS柱、Sephadex LH-20凝胶柱色谱和高效液相色谱等技术对其发酵产物进行分离纯化,利用1H-NMR、13C-NMR、HSQC、HSBC、COSY、MS等各种波谱技术鉴定其化合物的结构,总共分离鉴定了 26个化合物。其中8个为新化合物,分别是 27-O-deacetyltryptoquivaline(19),5-(I-hydroxyethyl)-2,3-dimethylcyclopent-2-en-l-one(20),27-O-propionyl-27-O-deacetyltryptoquivaline(21),12-epi-16-dehydroxyl-27-O-deacetyltryptoquivaline(22),12-epiM6-dehydrox-yltryptoquivaline(23),12-epi-27-O-deacetyltryptoquivaline(24),tryptoquivaline V(25),tryptoquivaline W(26)。1 8 个为已知化合物,分别是desmethylkotanin(1),orlandin(2),kotanin(3),(S)-2-Methyl-1-(4-oxo-3,4-dihydroquinazolin-2-yl)prop-yl acetate(4),(S)-2-(1-Hydroxy-2,2-dimethylpropyl)quinazolin-4(3H)-one(5),tryptoquivaline desacetyl derivative(6),fiscalin C(7),27-epi-tryptoquivaline(8),deoxytryptoquivaliiie(9),epi-fiscalin E(10),scequinadoline G(11),tryptoquival-ine L(12),quinadolines B(13),neosartoryadins B(14),clavatol(15),2,4(IH.3H)-喹唑二酮(16),cyclo(L-Trp-L-Trp)(17),lapatin B(18)。最后对部分化合物的生物活性进行了评价,结果显示,化合物3、18和24对1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)的自由基清除率最好,抗氧化能力较强,分别是55.53%、57.84%和55.53%,阳性药抗坏血酸的自由基清除率为90.87%;化合物15和26对乙酰胆碱酯酶的抑制效果较好,抑制率分别为32.8%和32.62%,其中阳性药他克林的抑制率为85.73%;化合物2和3对α-糖苷酶抑制效果最佳,抑制率分别为30.22%和75.31%,阳性药阿卡波糖的抑制率为20.97%。