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目的:在培养的原代肝细胞加入细胞因子TNF-α,分别置于常温(37℃)和亚低温(32℃)观察大鼠原代肝细胞葡萄糖-6-磷酸酶(G-6-Pase)活性及细胞培养上清液中葡萄糖浓度的变化,探讨TNF-α及亚低温对肝细胞糖代谢影响的机制。方法:用胶原酶IV消化并分离培养SD大鼠原代肝细胞,将大鼠原代肝细胞培养6天,分别在不同浓度TNF-α及不同温度下培养8h。(1)将每只大鼠培养的肝细胞分为两大组十小组:37℃对照组、1ng/mlTNF-α+37℃组、2ng/mlTNF-α+37℃组、10ng/mlTNF-α+37℃组、100ng/mlTNF-α+37℃组;32℃对照组、1ng/mlTNF-α+32℃组、2ng/mlTNF-α+32℃组、10ng/mlTNF-α+32℃组、100ng/mlTNF-α+32℃组;(2)用组织化学方法测定培养肝细胞中葡萄糖-6-磷酸酶(G-6-Pase)的活性,用生物化学方法测定细胞培养上清液中葡萄糖的浓度。结果:(1)常温组及亚低温组各组内G-6-Pase的活性,与对照组比较,在较低浓度TNF-α(1ng/ml、2ng/ml)时G-6-Pase的活性降低(p<0.05),在较高浓度TNF-α(10ng/ml、100ng/ml)时G-6-Pase的活性升高(p<0.05)。在同一TNF-α浓度下,亚低温与常温两组间G-6-Pase的活性变化无明显差异(p>0.05)。(2))常温组及亚低温组各组内各组内培养上清液中葡萄糖浓度,与对照组比较,在较低浓度TNF-α(1ng/ml、2ng/ml)时葡萄糖浓度降低(p<0.05),在较高浓度TNF-α(10ng/ml、100ng/ml)时葡萄糖浓度升高(p<0.05)。在同一TNF-α浓度下,亚低温与常温两组间葡萄糖的浓度仅在较高浓度TNF-α时有差异(p<0.05)。结论:TNF-α对培养之原代肝细胞的糖代谢有影响,较低浓度TNF-α能降低G-6-Pase的活性及葡萄糖浓度,较高浓度TNF-α能升高G-6-Pase的活性及葡萄糖浓度。仅在较高浓度TNF-α时,亚低温能降低培养上清液中葡萄糖的浓度。