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研究目的:通过研究表没食子儿茶素没食子酸酯((?)-Epigallocatechin-3-gallate,EGCG)诱导胰腺癌PANC-1细胞发生凋亡以及在其凋亡过程中EGCG对PI3K-Akt信号通路影响,探讨EGCG通过PI3K-Akt信号通路诱导胰腺癌细胞凋亡的机制。研究方法:1.体外培养胰腺癌PANC-1细胞,使用不同浓度的EGCG(0μg/mL,25μg/mL,50μg/mL、75μg/mL、100μg/mL)进行干预,并按浓度分组,干预12h、24小h、36h和48h后,分别通过倒置相差显微镜观察各组胰腺癌细胞生长情况。2. MTT法检测不同浓度的EGCG(0μg/mL,25μg/mL,50μg/mL、75μg/mL、100μg/mL)对胰腺癌细胞分别干预12h、24h、36h和48h的细胞存活率。3.应用流式细胞仪技术,通过AnnexinV-FITC/PI双染法检测不同浓度组的EGCG对胰腺癌细胞干预24h后的细胞凋亡率。4. Western-blot检测p-Akt、Akt、Caspase-3、Bax和Bcl-2蛋白的表达情况。研究结果:1.倒置显微镜镜观察显示:EGCG能够抑制PANC-1胰腺癌细胞的生长,当EGCG浓度大于25μg/mL,干预时间为24h,可明显看到细胞数量的减少。随着EGCG浓度的增加,贴壁细胞数量逐渐减少。2. MTT检测结果显示:随着EGCG浓度的增加和干预时间的延长,EGCG对PANC-1细胞生长的抑制作用逐渐增强且具有明显的时间-剂量依赖性。其中,50μg/mL的EGCG干预24h,细胞的存活率为(73.16 2.82)%(P<0.05);而100μg/mL的EGCG抑制作用最强,48h细胞存活率仅为(17.81 3.01)%(P<0.05)。3.流式细胞检测结果显示:EGCG可以诱导PANC-1细胞凋亡,随着EGCG浓度的增加,PANC-1细胞的凋亡增加,且EGCG主要诱导PANC-1发生早期凋亡。4.通过Western-blot检测显示:在EGCG干预24h后,随着EGCG干预浓度的增加,p-Akt的表达逐渐降低,并呈现浓度依赖性(P<0.05),而Akt的表达无显著差异(P>0.05);随着EGCG浓度的增加,Caspase-3表达逐渐增加,呈现浓度依赖性(P<0.05);随着EGCG浓度的增加,PANC-1细胞中的Bax表达升高,而Bcl-2表达逐渐下降,Bax/ Bcl-2的比值随着EGCG浓度的增高而增大,并成浓度依赖性(P<0.05)。研究结论:1. EGCG能够抑制PANC-1胰腺癌细胞的增殖,并呈浓度依赖性。2. EGCG能够诱导PANC-1胰腺癌细胞凋亡。3. EGCG在胰腺癌PANC-1细胞中抑制了PI3K-Akt信号通路中Akt的磷酸化过程,上调了Caspase-3和Bax的表达,下调了Bcl-2的表达,从而发挥了诱导细胞凋亡的作用。