外源生长激素注射对尼罗罗非鱼骨骼肌生长及GH-IGFs生长轴基因表达的影响

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骨骼肌是鱼体躯干的主要组成部分,肌纤维是构成骨骼肌的基本单元,骨骼肌生长包括新的肌纤维生成(即增生生长)及现有肌纤维体积的增大(即肥大生长)两种类型。鱼类肌肉发育生长受遗传、营养、环境和体内多种激素的共同调控。其中,GH-IGFs生长轴是鱼类生长调控的关键通路,此通路始于垂体分泌的生长激素(Growth hormone,GH),经血液循环与其受体结合后,刺激肝脏和其它组织中胰岛素样生长因子(Insulin-like growth factors, IGFs)的合成和分泌,IGFs作用于靶细胞和组织,启动细胞内的信号转导机制,从而促进组织细胞的生长和分化。为了探究外源生长激素对尼罗罗非鱼骨骼肌增生、肥大生长的影响及其分子机理,本研究对同一批次尼罗罗非鱼(Oreochromis niloticus)进行为期7周的外源重组人生长激素注射实验,并设置了PBS注射对照组,每周注射一次,测量体重、体长等表型生长指标;隔周采集背部骨骼肌,利用石蜡切片技术分析骨骼肌肌纤维的数目与面积变化;同时,检测肝脏和骨骼肌组织生长激素受体GHR1、GHR2和胰岛素样生长因子IGF-1、IGF-2以及骨骼肌组织中成肌分化因子MyoD1、MyoD2mRNA表达变化。实验结果显示,(1)连续注射7周后,实验组鱼的体长、体重分别比对照组快28.9%和46.9%,两组间差异显著;实验组与对照组鱼背侧第1肌节中的肌纤维数目分别为2479±180、2127±172,总面积分别为5121373±76271μm2、4571134±91395μm2,实验组鱼肌纤维出现了明显的数目增生和面积增大现象。(2)肝脏和骨骼肌组织中生长激素受体GHR1mRNA表达出现显著上调,而GHR2mRNA表达显著下调;肝脏和骨骼肌组织胰岛素样生长因子IGF-1、IGF-2mRNA表达皆明显上调;骨骼肌组织中成肌分化因子MyoD1、MyoD2mRNA表达水平有显著升高。综合上述结果,推测外源生长激素通过上调GH-IGFs生长轴相关基因及MyoDs基因的表达,进而对尼罗罗非鱼的表型生长、骨骼肌肌纤维的增生与肥大产生显著的促进作用。
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