基于联合测序的燕麦光周期不敏感基因挖掘

来源 :内蒙古农业大学 | 被引量 : 1次 | 上传用户:qq1036191963
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光是重要的环境因子,参与植物不同的生理过程,调控植物的生长和发育。植物对昼夜长短的生理反应称为光周期现象。根据日照长度和开花时间的关系,植物可以分为长日照、短日照和日中性植物。燕麦是一种分布于世界范围内的粮饲兼用作物,作为长日照植物,抽穗结实需要日照时长超过其临界日长。对日照长度的需求限制了燕麦的熟期及适种范围,影响了燕麦的产量。本研究选用对光周期不敏感品种gp012和对光周期敏感的品种红旗2号作为试验材料,对两个品种在短日照条件下的茎尖形态进行了观察,并以叶片和茎尖构建了 Illumina和Pacbio转录组数据库,分析并挖掘了燕麦光周期不敏感的候选基因。主要结果如下:1、12h日照生长条件下,光周期不敏感品种gp012的茎尖形态没有明显变化,光周期敏感品种红旗2号的茎尖组织在生长过程中逐渐干瘪萎缩,导致红旗2号不能抽穗结实。2、Illumina 测序共得到 63.63 Gb Clean Data,Q30 达到 90.32%,Pacbio 测序测得数据11.62 Gb,通过Illumina测序数据校正Pacbio测序数据并筛选出差异转录本。最后得到去冗余的60,673条转录本序列。3、对去冗余序列进行差异表达分析,共有7932条转录本在两个燕麦品种中差异表达。通过对差异转录本进行功能注释,7394个差异转录本得到注释。挖掘出燕麦光周期不敏感相关基因家族PRR家族。4、预测燕麦光周期不敏感调控模型:CRE1上调表达,促进ARR4的积累,维持了 AsPHYB的活化形式,引起强烈的光反应。节律钟组分AsTOC1、AsPRR5上调表达,改变了 AsPRR37的转录水平,引起下游MADS-box基因表达变化,维持了茎尖形态。5、2个燕麦品种中AsPRR家族成员AsTOCl、AsPRR5和AsPRR37在一个光周期内的不同时间出现表达峰值。该家族成员都包含两个保守结构域,分别是N端的REC结构域和C端的CCT结构域。AsPRR家族在2个燕麦品种中表达模式的差异可能是gp012对光周期不敏感的原因。6、克隆得到AsPRR37基因,该基因属于AsPRR家族,基因长度为4568bp,含有8个外显子和7个内含子。
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